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目的:研究KLF4基因与MMP9基因在肝癌组织和肝癌癌旁组织中的表达情况,探讨KLF4基因调节MMP9基因的表达变化对肝癌细胞侵袭转移能力的影响,探讨肝细胞癌侵袭和转移的分子机制,肿瘤细胞侵袭和转移的分子网络,为肝癌转移侵袭的治疗提供理论基础。方法:1、原发性肝癌病人癌和癌旁组织(距病灶2cm的组织)标本搜集后,通过免疫组化、q RT-PCR和WB检测50例肝癌组织及对应癌旁组织中KLF4基因和MMP9基因的表达。2、质粒(生物公司代为设计合成)转染后,上调肝癌细胞Hep G2中KLF4基因的表达,检测MMP9基因m RNA及蛋白表达水平的变化;3、运用Transwell侵袭实验、划痕实验观测转染后Hep G2细胞的侵袭转移能力的变化。4、统计分析采用SPSS19.0统计软件,正态分布、方差齐的测量数据,以c±s表示,用t检验做组间比较,用单因素方差分析做多组均数间比较,P<0.05,说明差异具有统计学意义。结果:1、q RT-PC R检测发现肝癌组织标本中KLF4基因m RN A的表达较对应的癌旁组织标本更低(P<0.05);而MMP9 m RNA的表达较对应的癌旁组织标本更高(P<0.05)。WB检测肝癌组织KLF4蛋白表达低于癌旁组织;而MMP9蛋白的表达高于癌旁组织。2、免疫组化检测结果发现KLF4蛋白在76%(38/50)的病例肝癌组织呈低表达,而仅有10%(5/50)的癌旁组织中呈低表达;MMP9蛋白在84%(42/50)的病例肝癌组织呈高表达,而仅有12%(6/50)的癌旁组织中呈高表达。3、q RT-PCR和WB检测发现过表达KLF4组中KLF4 m RNA和蛋白的表达较正常对照组和空白质粒组明显升高(P<0.05),而正常对照组、空白质粒组之间KLF4 m RN A表达量差异无统计学意义(P>0.05)。另外,过表达KLF4后,发现MMP9m RNA和蛋白的表达降低(P<0.05)。4、Transwell侵袭实验显示:相对于正常对照组和空白质粒组,过表达KLF4组的细胞侵袭能力降低(P<0.05);划痕试验结果显示:相对于正常对照组和空白质粒组,过表达KLF4组细胞的划痕愈合率明显下降(P<0.05)。结论:1、在原发性肝癌中,KLF4基因的表达明显低于癌旁组织,而MMP9基因表达明显高于癌旁组织。2、在肝癌细胞Hep G2中上调KLF4基因的表达可引起MMP9基因的表达下降,进而抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。