研究目的:结膜黑色素瘤(conjunctival Melanoma,CM)是一种罕见但致命的眼部恶性肿瘤,致盲致死率高,严重影响患者生活质量和生命安全。目前CM的基础研究主要围绕基因突变、缺失等DNA水平进行研究,极少有学者关注CM发病的表观遗传学机理机制。环状RNA(Circular RNA,circRNA)是近几年表观遗传学中的重要成员,在肿瘤发生中发挥多种调控模式。本研究主要针对CM这一黑色素瘤类型,进行circRNA相关的研究分析。材料和方法:针对CM组织标本及癌旁组织进行circRNA测序,并对测序结果进行分析。根据分析结果,筛选出特异性表达的circRNA。通过放线菌素D处理、RNase R消化及一代测序等方法鉴定circRNA的成环特性,并且通过建立CM的稳转细胞系、CCK8、平板克隆、软琼脂克隆和皮下成瘤实验研究circRNA对CM细胞表型的影响。通过RIP实验及生物信息学手段对circRNA下游进行初步探索。研究结果:CM组织及癌旁组织circRNA测序鉴定出一大批特异性表达的circRNA。CircMTUS1在病人组织及CM细胞系中特异性高表达,敲低circMTUS1可以显著抑制CM细胞系的生长增殖。CircMTUS1下游可能为hsa-miR-622及hsa-miR-1208,通过作为miRNA的吸附海绵进而调节下游靶基因,最终发挥促癌作用。研究结论:CM中circMTUS1为特异性高表达,具有促癌作用。CircMTUS1可能通过作为hsa-miR-622的hsa-miR-1208吸附海绵从而在CM中发挥促癌作用。研究目的:神经母细胞瘤是儿童最常见颅外实体肿瘤,恶性程度高。目前神经母细胞瘤发病原因尚未可知,但是有研究报道非编码RNA在其中发挥了重要作用。环状RNA是近几年研究较多的一种非编码RNA,其中circHIPK3已被证实在脑等神经系统富集并参与了全身多种恶性肿瘤的发生和进展。本研究主要关注circHIPK3这一特异性在神经系统富集的环状RNA对神经母细胞瘤这一颅外实体肿瘤的作用及其作用机制。材料和方法:通过放线菌素D、RNase R及测序等手段验证神经母细胞瘤中circHIPK3为环状RNA。结合神经母细胞瘤标本,对circHIPK3表达量进行检测。建立神经母细胞瘤circHIPK3稳转系,通过CCK8实验和transwell实验研究circHIPK3对神经母细胞瘤生物学影响。生物信息学、荧光素酶报告基因及RNA pull down验证circHIPK3与下游miR-637的结合,rescue实验进一步验证circHIPK3与miR-637的关系,蛋白质免疫印记实验验证circHIPK3对miR-637下游AKT1蛋白的影响。研究结果:circHIPK3在神经母细胞瘤中为环状RNA,并且处于高表达状态。敲低circHIPK3显著抑制神经母细胞瘤细胞的增殖、克隆形成与迁移。miR-637能与circHIPK3在神经母细胞瘤中结合,影响下游AKT1表达。研究结论:神经母细胞瘤中circHIPK3特异性高表达,具有促癌作用。CircHIPK3作为miR-637的吸附海绵影响下游AKT1表达从而在神经母细胞瘤中发挥促癌作用。