木兰科6属20种植物的RAPD和ISSR分析

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应用RAPD和ISSR标记对木兰科6属20种植物的遗传多态性和亲缘关系进行分析,比较属间、属内的遗传差异,并结合前人的研究结果,对木兰科6属及属下类群的系统位置进行探讨,旨在为木兰科植物的系统分类及其它研究提供实验依据。研究结果如下:(1)建立了适合于木兰科6属20种植物DNA提取的改良CTAB法Ⅰ,用该法提取的DNA能满足RAPD和ISSR分析的要求;(2)采用单因素结合均匀试验设计优化得到适合于木兰科6属20种植物RAPD和ISSR分析的PCR体系。优化的RAPD-PCR体系为:Mg2+3.0 mmol/L、dNTP 0.15 mmol/L、引物0.40μmol/L、模板DNA20 ng/20μL、Taq DNA聚合酶1 U;优化的ISSR-PCR体系为:Mg2+ 1.00mmol/L、dNTP 0.20 mmol/L、引物0.40μmol/L、模板DNA 40 ng/20μL、Taq DNA聚合酶1 U;(3)分别从112条RAPD引物和99条ISSR引物中筛选出14条RAPD引物和12条ISSR引物用于RAPD和ISSR分析。14条RAPD引物共检测到287个位点,其中多态位点占99.30%,Nei’s基因多样度为0.3591,Shannon信息指数为0.5334;12条ISSR引物共检测到222个位点,且222个位点都是多态的,Nei’s基因多样度为0.3477,Shannon信息指数为0.5218。RAPD和ISSR分析都表明木兰科6属20种植物具有丰富的遗传多态性;(4)基于RAPD和ISSR扩增条带数据建立了相应的Nei’s(1979)遗传距离矩阵,以及UPGMA树图。基于RAPD标记和ISSR标记构建的树图,两者趋势大致相近,但不完全相同;(5)综合木兰科6属20种植物的RAPD和ISSR分析结果,支持鹅掌楸属、木莲属、拟单性木兰属和观光木属的独立;建议重新界定木兰属的范围,并成立玉兰属;建议取消含笑属下亚属和组的划分,设为含笑属。
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