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冰糖橙（Citrus sinensis Osbeck）是20世纪70年代湖南省选育出的优良甜橙品种，它以肉质脆嫩化渣、风味浓甜、少核或无核而深受消费者喜爱，在湖南省黔阳县和永兴县等地重点推广。进入20世纪90年代后，在部分产区由于柑橘碎叶病毒（Citrus Tatter Leaf Virus，CTLV）的感染等原因，使冰糖橙的单位产量下降，果实品质变劣，失去了原有品种的优良特性，市场竞争力下降。目前，由于冰糖橙组织培养方面的基础性研究的缺乏，很大程度上限制了生物技术在其品种改良中的应用。因此，建立冰糖橙胚性愈伤组织诱导及再生体系，并通过胚性愈伤组织培育出无病毒苗木，或进行冰糖橙品种改良，已成为目前冰糖橙生物技术研究中亟待解决的关键问题。 本研究以冰糖橙成熟果实中未发育胚珠为外植体，进行胚性愈伤组织的诱导和植株再生，并对再生植株进行了指示植物与A蛋白酶联免疫吸附法（PAS-ELISA）检测CTLV。建立了冰糖橙未发育胚珠培养获得无CTLV苗木的培养体系。主要的结果如下： 1．在不同的培养基和不同的培养条件下，冰糖橙胚性愈伤组织和胚状体的发生频率不同，麦芽提取物和GA3有利于胚性愈伤组织的发生，暗培养有利于胚性愈伤组织的诱导。 2．与以往的研究结果不同的是，在诱导培养基中添加AgNO3并不能促进冰糖橙胚性愈伤组织的形成，反而抑制了胚状体的发生；然而，在继代培养基中添加5mg／L的AgNO3有利于小而弱的胚状体基部形成胚性愈伤组织，形成胚性愈伤组织的百分率达28％，经过多次继代处理建立了冰糖橙的胚性细胞系。 3．冰糖橙胚状体在EME500（MT+ME500mg／L）、EME1000（NT+ME1000mg／L）与MKBN（MT+KT 0.5mg／L+BA0.5mg／L+NAA 0.1mg／L）三种培养基上再生芽的比率不同，MKBN培养基分化的芽最多（达88.2％），EME1000次之（80.9％），第三是EME500（78.7％）。 4．对冰糖橙再生芽比较了试管生根和试管嫁接两种成苗方法。在1／2MT培养基上单独添加NAA（0.5mg／L）有利于再生芽生根，生根率达76.7％；以酸橙（Citrus aurantium）作砧木进行试管嫁接，其嫁接成活率可达88.9％。 5．对再生苗进行了CTLV检测：同时采用了指示植物腊斯克枳橙（Rusk Citrange）法与PAS-ELISA法检测，两种方法检测结果一致，均未检测到CTLV，可初步确定所获得的再生苗为无CTLV的苗木。 对利用未发育胚珠诱导胚性愈伤组织的优势和利用未发育胚珠培养培育无病毒苗木体系与热处理、茎尖培养、茎尖微芽嫁接获得无病毒苗木体系之间的优缺点、CTLV的检测技术以及无病毒苗木在柑橘生产中的应用价值进行了讨论。