寡糖和小肽抗消化道氧自由基作用的研究

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现代动物饲养采用高脂、高蛋白、高糖及各种高浓度的维生素和矿物质,使体内自由基生成量增加,极易打破机体内的抗氧化防御体系,诱发许多消化道系统疾病。寡糖无毒、无热源、无变异,具有特殊的生理活性和功能,从天然动植物蛋白质中得到的抗氧化肽具有低价、高效和低毒的特性,适宜做为抗氧化剂使用。基于不同来源的小肽和寡糖对消化道氧自由基清除作用的研究,不仅对预防和治疗高膳食诱发的各种疾病,同时对提高动物生产和改善畜产品品质具有非常重要的意义。本文在对胶原蛋白肽、米蛋白肽及甘露寡糖和壳寡糖体外清除自由基能力检测的基础上,通过建立高脂动物模型诱导小鼠消化道氧化应激,研究不同来源的小肽和寡糖及组合对小鼠体内消化道氧自由基清除作用的影响。主要实验结果如下:(1)采用高效液相色谱法对胶原蛋白肽、米蛋白肽的相对分子量分布及氨基酸组成进行了检测,结果显示胶原蛋白肽、米蛋白肽中相对分子质量在180~2000 Da范围内的肽类分别占总量的63.62%和76.89%,水解氨基酸中含有的主要抗氧化氨基酸总量分别占总氨基酸的20.82%和28.28%。(2)通过测定胶原蛋白肽、米蛋白肽、甘露寡糖和壳寡糖对DPPH·,·OH和02-·自由基清除能力发现,这四种物质在体外对DPPH·都具有很好的清除能力,在-OH自由基清除体系中壳寡糖的清除效果要低于其它三种物质,米蛋白肽、甘露寡糖和壳寡糖对超氧阴离子的清除作用不明显。(3)选取72只雄性ICR小鼠,随机分为6组(n=12),分别饲喂正常日粮、高脂日粮、分别添加0.5%CP(胶原蛋白肽)、0.5%RP(米蛋白肽)、0.5%MOS(甘露寡糖)、0.5%COS(壳寡糖)的高脂日粮。6周后处死小鼠,测定各组小鼠血液和消化系统各组织的自由基水平和抗氧化指标,并用HE染色光镜观察各组小鼠小肠组织结构的变化。结果表明:高脂日粮分别添加0.5%CP、0.5%MOS和0.5%COS均能显著降低高脂日粮小鼠血浆和消化道系统组织的自由基水平,提高小鼠机体的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及总抗氧化能力(T-AOC),减少体内的丙二醛(MDA)含量恢复到对照组水平,效果明显优于同剂量下的米蛋白肽;高脂饲喂使小鼠小肠绒毛脱落严重,绒腺比变小,高脂日粮分别添加0.5%CP、0.5%RP、0.5%MOS和0.5%COS均能够减轻小肠绒毛短缩融合、脱落现象,使高脂小鼠小肠绒毛有所增长,隐窝深度变浅,绒腺比增大。(4)选取72只雄性ICR小鼠随机分为6组(n=12),分别饲喂正常日粮、高脂日粮、分别添加0.5%MOS+0.5%CP、0.5%MOS+0.5%RP、0.5%COS+0.5%CP、0.5%COS+0.5%RP的高脂日粮。6周后处死小鼠,测定各组小鼠血液和消化系统各组织的自由基水平和抗氧化指标。结果显示:0.5%MOS和0.5%CP的联合使用在降低小鼠血液自由基水平和提高机体抗氧化能力方面表现出显著的互作效应,0.5%MOS和0.5%RP的联合使用在肝脏与胰腺组织中对提高CAT、GSH-PX酶活性也表现出一定的协同作用。高脂日粮添加适量胶原蛋白肽、米蛋白肽、甘露寡糖和壳寡糖可有效清除小鼠消化系统的自由基,提高其抗氧化能力,抑制高脂日粮造成的肠道粘膜损伤,寡糖和小肽的联合使用具有增效作用。
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