为了阐明疏肝解郁治法的代表方剂四逆散改善睡眠的药理作用和确认其药效物质基础，本实验研究应用中枢神经系统药理和中药血清药物化学研究方法，运用脑电描记和色谱技术，进行了四逆散水煎液对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间和正常与失眠大鼠睡眠周期的影响的药理实验及四逆散水煎液血中移行成分的认定。 本研究首先建立了以色谱指纹图谱和主要化学成分含量测定为内容的四逆散水煎液的质量控制方法与标准，目的在于保证四逆散的改善睡眠的药理和血中移行成分认定研究结果的准确性与重现性。实验结果：四逆散水煎液的HPLC指纹图谱，240nm下确定了20个共有峰、210nm下确定了24个共有峰。以柚皮苷吸收峰为基准，计算了各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，RSD值均在3％以内，采用相关系数法计算了不同批次四逆散水煎液指纹图谱的相似度，均在0.99以上。对四逆散水煎液中的芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸进行了含量测定，分别为8.7221、49.6487、3.7472、3.9402mg/g(水煎液浸膏粉)。 以上述实验结果为基础，四逆散改善睡眠作用的药理实验研究结果为：四逆散水煎液浸膏粉7.075g/kg(约含芍药苷62mg、柚皮苷351mg、橙皮苷27mg、甘草酸28mg)，连续灌胃7天，能显著延长戊巴比妥钠所致小鼠的睡眠时间；四逆散水煎液浸膏粉4.9525g/kg(约含芍药苷43mg、柚皮苷246mg、橙皮苷19mg、甘草酸20mg)，连续灌胃7天，能延长正常与失眠大鼠的总睡眠时间，在睡眠时相上主要表现为延长SWS2和REMS，从而表明四逆散具有显著的改善睡眠作用。通过对四逆散水煎液与其拆方后水煎液中化学成分比较分析和主要化学成分含量测定结果表明：四逆散全方煎煮过程产生了各单味药中不含有的新的化学成分，四逆散中各单味药的化学成分之间存在着明显地相互增溶作用。四逆散水煎液血中移行成分认定研究结果为，在确定了甲醇法制备血清样品和给药5h为最佳采血时间基础上，建立了四逆散血清指纹图谱，确定了8个共有峰；同时对血中移行成分来源进行了认定，其中1号、2号成分均来源于枳实，属枳实及四逆散水煎物中可直接入血成分，3号成分为白芍的体内代谢转化物，4号成分为甘草的体内代谢转化物，5号成分为枳实体内代谢转化物，6号成分属甘草及四逆散水煎物可直接入血成分，7号成分为柴胡经配伍后入血的成分，8号成分为枳实与其它药物配伍经体内代谢所产生的新物质；另外分析了连续给药7天与单次给药后四逆散血中移行成分的动态变化，对比后发现，四逆散水煎物经过连续给药7d后血清中成分比一次给药血清中多出现α、β、γ、δ、ε、θ6个成分，其中γ成分为芍药苷，θ成分为甘草次酸。 本研究结果将为临床应用四逆散改善睡眠提供现代药理实验依据，将为研发高效、低毒的具有改善睡眠作用的中药新药奠定基础。