本实验研究分为三部分,下面就研究目的、方法、结果、结论作如下分述。第一部分急性冠脉综合症病人血清代谢组学研究目的:本研究的目的是确定急性冠脉综合征（ACS）患者潜在的代谢生物标志物及其发病机制。方法:收集29例健康成人外周血5ml,45例ACS患者外周血5ml,离心取血清,利用基于超高效液相色谱联用质谱（UPLC/Orbitrap MS）的血清代谢组学方法采集数据。多变量统计分析用于筛选ACS生物标志物,差异物质利用KEGG,HMDB数据库进行鉴定,并利用生信分析方法进行差异代谢物通路富集分析,利用IPA进行差异代谢物进行网络构建,寻找急性冠脉综合征的发病机制。结果:总共鉴定了 69个生物标志物,在19个代谢途径中富集;43个生物标志物显著上调,而ACS组有26个（包括顺式-8,11,14-二十烷三烯酸甲酯8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid在内的）生物标志物显著下调。主要种类为鞘脂（SM）、肉桂酸、胆碱、和伯酰胺。受试者操作特征（ROC）曲线分析显示,溶血磷脂胆碱lysoPC（20:4（8Z,11Z,14Z,17Z）/0:0）（ROC曲线下面积,AUC=0.936）、SM（d18:0/16:0）（ROC 曲线下面积 AUC=0.932）和 SM（d18:1/14:0）（ROC AUC=0.923）具有较高的ACS诊断能力。使用这些组合生物标志物构建的诊断模型的AUC值为0.96。通过代谢途径富集分析发现甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成等代谢途径在ACS患者中有异常富集。结论:lysoPC、鞘脂（SM）可以作为潜在代谢标志物提高ACS的诊断效果。甘油磷脂代谢、不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成可能在ACS中起着重要作用。同时IPA网络分析显示这些生物标志物与心肌肥大信号通路、ERK/mapk信号通路、NF-kappaB信号通路、心血管系统一氧化氮（NO）信号通路和TLR信号通路有关。这些发现将有助于提高急性冠脉综合征的准确诊断、治疗以及机制研究能力。第二部分功能性代谢标志物的作用机制研究目的:采用人血管平滑肌细胞（VSMC）,人单核细胞（THP1）以及人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）三种细胞模型,初步探讨了 EAME对冠状动脉粥样硬化病理形成的影响。方法:CCK8 检测 8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid（EAME）对三种细胞增殖的影响,ELISA检测THP-1细胞上清液细胞因子表达水平,western blot检测增殖、凋亡相关蛋白变化,western blot检测相关信号通路关键蛋白表达水平,探讨MAPK和PI3K/AKT/mTOR信号通路在EAME对抑制冠状动脉粥样硬化机制中的作用:结果:8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid对上述三种细胞的增殖均有显著抑制作用,提示该代谢物在抑制冠状动脉粥样硬化、抑制支架内再狭窄、抗炎等方面可能发挥作用。进一步评估其胞内炎症因子的影响,结果发现8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid干预下细胞因子表达水平明显下降,western blot和RT-PCR检测到MAPK和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白出现变化。结论:因此我们可以初步判定8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid应是一种有调节功能的脂肪酸代谢物,而且在促进细胞凋亡可能发挥重要作用,作用机制可能是通过调控MAPK和PI3K/AKT/mTOR信号通路起作用。第三部分功能性代谢标志物在动脉粥样硬化大鼠的功能评估目的:研究8Z,11Z,14Z-Eicosatrienoic Acid在动脉粥样硬化大鼠模型中的作用。方法:30只大鼠随机分为对照组、模型组（AS）、AS+EAME组（AS+EAME）三组。正常组始终喂饲普通饲料;模型组喂饲高脂饲料（胆固醇1%、胆盐0.1%、猪油10%、蛋黄粉与全脂奶粉5%,剩余为普通饲料）8周;EAME组前8周喂饲高脂饲料,后4周同时给予EAME 1 mg/kg进行给药治疗。实验期为8周。实验结束后,取大鼠血清、主动脉和肝脏,方便分成三份,一份为0.5 mm3大小组织,用4%多聚甲醛-0.1M磷酸缓冲液（pH7.3-7.4）固定保存,做透射电镜检查;第二部分用福尔马林固定,进行油红染色;最后一部分用福尔马林固定,进行病理形态学观测。应用酶联免疫分析法,测定大鼠血清中脂质水平TG、TC、LDL-C、HDL-C、TNF-α、IL-6以及IL-1β的水平。结果:在第8周末,与正常对照组相比,动脉粥样硬化高脂血症组大鼠斑块面积显著增多,说明高脂喂养可以造成大鼠动脉粥样硬化高脂血症模型;给药组斑块面积较模型组有所减少。与正常组血管比较,动脉粥样硬化高脂血症组平滑肌细胞结构疏松,胞浆内有大量空泡;而给药组平滑肌细胞内可见少量血管内皮,内皮细胞内少量脂滴和空泡。与正常组血管比较,动脉粥样硬化高脂血症组血管内皮细胞损伤严重,内膜通透性增加,可见脂质入侵;给药组上述症状均有不同程度改善。与正常对照组相比,动脉粥样硬化高脂血症模型组大鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）均明显升高,且差异有统计学意义（P＜0.05）。与动脉粥样硬化高脂血症模型组比较,EAME组血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）均明显降低,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）明显升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）结论:动脉粥样硬化大鼠模型实验证实EAME具有改善动脉粥样硬化的功能。