论文部分内容阅读
内生细菌是促进植物生长,提高植物抗病抗逆能力的微生物资源,广泛分布于各种植物体内。本研究通过调查枣不同品种的内生细菌资源,研究了枣内生细菌的种群组成及其分布规律,揭示了枣内生细菌的多样性及优势菌种分布,为促生抗病内生细菌的筛选和在可持续农业中的应用奠定基础。主要结果如下:从金丝小枣、梨枣、冬枣、尜尜枣和龙枣5个品种健康植株的叶片、不同类型枝条中共分离、纯化出113株菌落形态和颜色不同的菌株。枣不同品种、不同部位分离获得的内生细菌数量密度和种类不同。不同品种的内生细菌数量密度为:龙枣(16.44×104CFU/g)>冬枣(9.59×104CFU/g)>金丝小枣(5.00×104CFU/g)>梨枣(4.21×104CFU/g)>尜尜枣(2.91×104CFU/g)。不同部位的内生细菌数量密度为:当年生枣头上枣吊枝(16.91×104CFU/g)>多年生枣头上枣吊枝(12.07×104CFU/g)>多年生枣头枝(7.58×104CFU/g)>当年生枣头枝(0.84×104CFU/g)>叶片(0.73×104CFU/g)。通过平板对峙培养,筛选出45株对枣铁皮病具有拮抗作用的菌株,占总数的37%。经培养滤液抑菌活性测定,菌株081和113抑菌作用较强,其抑制率在36.7%-61.7%之间。两菌株培养滤液抑菌活性在50℃~90℃范围内具有热稳定性;在pH5.0~9.0范围内具有酸碱稳定性,pH7.0~8.0时抑菌活性最高。菌株081随着酸、碱性不断增加,抑菌活性逐渐下降;菌株113在强酸处理下抑菌活性大大降低,但在强碱处理下其抑菌活性下降不明显。菌株081和113的最适生长pH值分别为6.0和9.0;最适生长温度分别为30℃和28℃。根据形态学特征和生理生化特性,初步鉴定出菌株081和113均属于沙雷氏菌属。对菌株081和113的16SrDNA基因片段进行扩增、克隆,经测序获得两菌株的16SrDNA序列长度分别为1555bp和1556bp。菌株081与沙雷氏菌属的粘质沙雷氏菌的同源性达到99%,因此认为菌株081为粘质沙雷氏菌;菌株113与粘质沙雷氏菌的同源性为95%,可能为沙雷氏菌属的一个新种,没有检测到能与菌株113归为同一个种的同源序列。