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[目的]探讨去氧麻黄碱,压力和ComplenxinⅡ是否对中枢神经递质多巴胺的分泌产生影响。
[方法]1.体重20-30克的基因Complenxinll缺陷鼠和野生型鼠共120只。80只用于行为学观察,40只用于纹状体多巴胺含量的测定┏━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━┓┃组别┃对照组(生理盐水)┃实验组(去氧麻黄碱)┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃野生型压力组┃15┃15┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃缺陷型压力组┃15┃15┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃野生型无压力组┃15┃15┃┣━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃缺陷型无压力组┃15┃15┃┗━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━┛2.母子分离实验对压力组,自小鼠出生第二天起,每天早10点到12点之间,把小鼠单独放在一个纸杯中,与1小时,持续17天。
3.PCR确定基因型
4.注射激动剂和行为学观察(多运动实验)
5.纹状体多巴胺含量的测定应用高效液相加电化学检测器的方法。纹状体称重后,0.1mol/L高氯酸匀浆,15000g离心15min,4℃,然后取上清夜10μl进样。电化学检测器电压+0.75mV。流动相:0.1mol/L柠檬酸,0.1mol/L乙酸钠,EDTA5mg/L,辛烷磺酸钠230mg/L(pH3.5),流速1ml/min。
[结果]一.纹状体多巴胺含量的测定:纹状体多巴胺含量的测定(应用高效液相加电化学检测器)(-x±s,μg/g,n=5)┏━━━━━━━━┳━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━┓┃组别┃对照组(生理盐水)┃实验组(去氧麻黄碱)┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃野生型无压力组┃12.05±1.45┃22.15±1.35┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃野生型压力组┃15.08±1.85┃29.54±2.34┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃缺陷型无压力组┃17.56±1.97┃32.56±3.21┃┣━━━━━━━━╋━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━┫┃缺陷型压力组┃19.35±2.14┃38.42±3.65┃┗━━━━━━━━┻━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━┛野生型无压力组,野生型压力组,基因缺陷压力组,基因缺陷无压力组在注射去氧麻黄碱后与注射氯化钠组相比(P<0.05,T检验),纹状体多巴胺含量显著升高,以基因缺陷压力组纹状体多巴胺含量增多最为明显。
二.行为学观察(多运动实验)1.无论野生型无压力组,野生型压力组,基因缺陷压力组,基因缺陷无压力组在注射去氧麻黄碱后与注射氯化钠组相比,均出现运动的不同程度的增多。
2.以基因缺陷压力组的运动增多最为明显,与无压力组基因缺陷型组和无压力组正常型做对比(P<0.001)。反映出压力是ComplenxinⅡ缺陷鼠,中枢神经系统的多巴胺分泌的重要因素。
3.无压力组中的野生型和基因缺陷组做对比,基因缺陷组注射受去氧麻黄碱后的运动增多高于野生型组(P<0.01)。
[结论]野生型压力组,基因缺陷压力组,野生型压力组无压力组,基因缺陷无压力组在注射去氧麻黄碱后与注射氯化钠组相比,均出现运动的的不同程度的增多,及纹状体多巴胺分泌增多程度不同。中枢神经系统多巴胺分泌受去氧麻黄碱,压力和ComplenxinⅡ的多重影响.去氧麻黄碱对ComplenxinⅡ基因缺陷鼠中枢神经递质分泌的影响显著高于对正常鼠的影响,有统计学意义。