猫嵌杯病毒（Feline calicivirus,FCV）是引起猫科动物上呼吸道疾病的常见病原体之一,20～53%的猫上呼吸道疾病是由FCV感染引起。猫感染FCV的主要临床症状为发烧、结膜炎、鼻炎、口腔溃烂或慢性口腔炎,偶尔也出现皮肤溃烂、跛行和肺炎。猫感染FCV后发病率较高,但死亡率很低。近年来,已有研究表明FCV强毒株可导致高致死率,严重危害着猫科动物的健康。FCV常与其他病毒混合感染猫科动物,不利于诊断,因此建立快速准确的检测方法至关重要。本试验通过对本实验室分离的2株病毒株与其他国内外典型分离株进行序列比对,结果显示与FCV-SX1株相比,FCV-SX2株与疫苗株的同源性较低与流行株的同源性较高,因此选择FCV-SX2株作为抗原,并对其大量培养后进行分子筛纯化和SDS-PAGE鉴定。将纯化的病毒10倍倍比稀释接种于F81细胞,测定其TCID50,结果显示其TCID50为10-9.3,BCA测定其蛋白浓度为1.3μg/μL。将FCV的VP1基因及nano荧光素酶基因连接至真核表达载体PVAX I中,构建重组质粒PVAX I-nano-VP1,将其转染至COS1细胞进行Nanoluc-VP1重组蛋白的真核表达,利用ELISA方法鉴定的阳性和阴性血清建立检测抗FCV抗体的LIPS检测方法。纯化好的病毒与弗氏佐剂乳化免疫小鼠,免疫四次后,利用中和试验测定小鼠中和抗体效价,选择中和抗体效价在1:3200以上的免疫小鼠,将免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合。使用LIPS检测方法筛选分泌抗FCV单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株。经过三次亚克隆,共筛选到5株稳定分泌抗FCV单抗的阳性杂交瘤细胞株分别命名为1E2,4C3,5F11,6G9,7D2,其中有两株（4C3,5F11）有中和活性。1E2,4C3和6G9的亚类鉴定为Ig G1型,5F11和7D2为Ig M型,轻链均为κ链。以FCV-SX2病毒株作为抗原,阳性杂交瘤细胞分泌的抗体作为一抗进行Western Blot鉴定,结果显示5株单抗均可识别FCV-SX2病毒株,有良好特异性。将杂交瘤细胞接至小鼠腹腔,用LIPS检测方法检测腹水效价,结果显示1E2和6G9的腹水效价为1:12800,4C3、5F11和7D2的腹水效价为1:25600。本试验对建立FCV快速准确的检测方法有重要价值。