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目的:通过解毒益智方的主药黄连的提取物——黄连多糖对阿尔茨海默病线虫模型的作用,观察黄连多糖对线虫模型神经保护及Aβ肽聚集作用的影响,为解毒益智方在临床治疗AD提供有力的理论依据。方法:以课题组制备的解毒益智方冻干粉为基础实验原料提取黄连多糖,以超声提取法、煮沸提取法和冷浸提取法对实验材料进行黄连多糖的提取,考察最佳提取条件,获得纯度较高的黄连多糖提取物,进而制备阿尔茨海默病转基因线虫模型,对实验模型添加黄连多糖提取物,其中对照组(含黄连多糖0mg/L)、低剂量组(含黄连多糖25mg/L)、中剂量组(含黄连多糖50mg/L)、高剂量组(含黄连多糖100mg/L),考察不同浓度的黄连多糖对线虫寿命、神经保护以及Aβ肽聚集作用的影响。结果:1.以解毒益智方为原料提取黄连多糖,确定超声提取法提取黄连多糖的得率为39.4%,煮沸提取法提取黄连多糖的得率为42.7%,冷浸提取法提取黄连多糖的得率为22.8%。2.黄连多糖对线虫寿命的影响实验表明,在2d时,对照组平均存活率为22.2-28.6%,25mg/L实验组平均存活率为63.0-72.3%,50mg/L实验组平均存活率为48.9-62.5%,100mg/L实验组平均存活率为59.3-72.03%。在5d时,对照组平均存活率仅为5.6-10.2%,25mg/L实验组平均存活率仅为13.0-29.8%,50mg/L实验组平均存活率仅为13.3-18.8%,100mg/L实验组平均存活率仅为26.0-28.8%,与25mg/L实验组线虫寿命水平相近。3.以相同的实验分组及给药浓度的条件下对线虫模型进行瘫痪率实验,从线虫接种至36h,线虫未瘫痪率各实验组均高于90%,从36-60h,线虫瘫痪率明显增多,至实验60h时,25mg/L组线虫未瘫痪率为50.0%,50mg/L组线虫未瘫痪率为56.7%,100mg/L组线虫未瘫痪率为65.9%,从60-92h,受试线虫瘫痪率下降更加明显,至92h,各实验组线虫基本完全瘫痪,但其中100mg/L实验组仍有6.7%的线虫未发生瘫痪。4.不同浓度黄连多糖对线虫模型Aβ肽聚集影响的实验结果显示:对照组Aβ肽聚集非常紧密,周身可见染色的蛋白聚集团,25mg/L实验组可以看到零星的空洞,50mg/L实验组可见大块儿荧光染色空洞,比低剂量组空洞明显增多、增大,100mg/L实验组荧光染色空洞现象更加明显,且部分线虫头部几乎不可见荧光染色。裂解线虫后染色测定裂解液荧光强度,显示对照组的荧光强度为0.74±0.08,25mg/L实验组的荧光强度为0.71±0.06,50mg/L实验组的荧光强度为0.58±0.07,100mg/L实验组的荧光强度为0.49±0.05,随着药物浓度的增加,荧光强度逐渐降低。结论:1.黄连多糖以煮沸法提取能够获得更大的得率,最佳提取条件为料液比为1:3,提取温度为100℃,提取时间为20min,提取次数为5次。2.黄连多糖对线虫模型寿命的延长具有明显效果,25-100mg/L药物浓度对线虫寿命的影响没有太大差异。3.黄连多糖实验组对线虫的神经保护作用明显,神经保护的能力在25-100mg/L区间内随着药物浓度的增加而提高。4.25-100mg/L的黄连多糖对AD线虫模型Aβ肽聚集具有显著抑制作用,在实验浓度区间随药物浓度的增加,抑制作用与浓度呈正相关。