单个核细胞与骨肉瘤细胞之间相互作用的研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:sylsq3
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[目的]体外建立骨肉瘤HOS细胞与脐血单个核细胞共培养模型,观察共培养微环境中炎症因子TGF-β、IL‐6、IL‐10的浓度变化对骨肉瘤HOS细胞生物学性状的影响。[方法]1.提取脐血单个核细胞,与骨肉瘤HOS细胞共培养3、5、7d,共培养组为实验组,两种细胞单纯培养设为对照组。2.应用ELISA技术检测各组上清液中细胞因子TGF-β、IL‐6、IL‐10的含量变化。3.应用transwell小室培养法、MTT法检测各组骨肉瘤HOS细胞侵袭、迁移及增殖能力等生物学性状的变化。4.应用SPSS13.0软件统计分析,计量资料用均数±标准差(Mean±SD)描述,数据进行正态性检验,两组间比较采用独立样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析,以P<0.05表示差异有统计学意义。[结果]1.在共培养的第1d,肿瘤细胞周围有大量的单个核细胞聚集,肿瘤细胞状态欠佳;随着共培养时间的延长,相比对照组,共培养组单个核细胞逐渐减少,而肿瘤细胞生长旺盛。2.骨肉瘤HOS细胞能够自身分泌较高浓度的细胞因子TGF-β,而脐血单个核细胞分泌的TGF-β的量甚少;两种细胞共培养后3d,共培养组的TGF-β浓度明显高于HOS组(p<0.05);共培养5d,两组相差无统计学意义;共培养7d,共培养组的TGF-β浓度明显低于HOS组(p<0.05)。另外,正常情况下单个核细胞分泌极微量TGF-β。3.共培养组IL-6、IL-10的浓度明显高于同一观察点的对照组(p<0.05),也高于同一时间点的单个核细胞培养组,其中共培养第3天,共培养组与单个核细胞对照组差别有显著性意义(p<0.01)。共培养7天,微环境中IL-6浓度均大于对照组。另外,骨肉瘤细胞对照组分泌极少量IL-10。4.共培养第3d,共培养组骨肉瘤HOS细胞的迁移、侵袭数量减少,增殖能力明显受抑制;共培养第5d,培养组与对照组骨肉瘤HOS细胞的迁移、侵袭及增殖能力差异无明显统计学意义;随着共培养时间的延长,在第7d时,共培养组骨肉瘤HOS细胞的迁移、侵袭数量明显增多,增殖能力明显增强,具有明显统计学差异(p<0.05)。[结论]1、骨肉瘤细胞与脐血单个核细胞共培养微环境可促进骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭;2、TGF‐β与IL‐6可能是参与骨肉瘤细胞生物学改变的重要因素;3、微环境通过促进IL‐6、IL‐10等细胞因子的分泌,介导炎症反应和免疫抑制。
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