硒与老鹰茶总黄酮协同抗油脂氧化及其抗癌活性研究

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目的:老鹰茶是用毛豹皮樟的嫩芽、叶经杀青、揉捻、炒制等工序加工制成的一种植物代用茶,含有丰富的黄酮类物质,具有降血脂降血糖、抗炎症、抗氧化、抑菌、降胆固醇、保肝作用、提高免疫力等多种生物活性。我国老鹰茶地理分布广,资源丰富,往往以农副产品的形式销售,其深加工产品相对较少。老鹰茶作为一种药食同源材料,其药用价值和保健价值值得深入研究与开发。本文以老鹰茶为原料,从中提取黄酮类化合物,以硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸钠和老鹰茶黄酮为研究对象,对比单一组分和复配组分对山茶油、山桐子油、猪油的协同抗氧化效果;并以肝癌细胞为样本,探究其对肝癌细胞增殖和迁移活性的作用。通过研究开辟硒在油脂中应用技术,开发油脂天然抗氧化剂的新物质,实现科学补硒,延缓油脂氧化,提高其使用价值奠定理论和技术基础。方法:用乙醇浸提老鹰茶总黄酮,通过大孔树脂D101静态吸附纯化后扫描红外光谱,鉴定提取物的结构,采用schaal烘箱法和硫代硫酸钠滴定法测定油脂16天内过氧化值的变化,判定抗氧化剂的抗氧化效果;以Hcclm3细胞研究对象,通过CCK-8法和细胞划痕法测定硒与老鹰茶总黄酮协同对细胞增殖率和迁移率的影响。结果:(1)老鹰茶乙醇提取物的红外光谱特征官能团对比分析为黄酮类化合物。以山桐子油为研究对象,通过对比油脂的过氧化值,筛选出乳化剂的最佳选择是1.2%单甘脂,老鹰茶总黄酮的最适添加量是0.015g/30g。(2)硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸钠和老鹰茶总黄酮分别单独作用于山茶油时,具有明显的抗氧化效果,添加量越多,油脂的抗氧化效果越强。三种硒分别与老鹰茶总黄酮复配后对山茶油的抗氧化效果优于各单组分添加,表明硒与黄酮复配后对山茶油抗氧化性具有一定的协同作用。硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸钠和老鹰茶总黄酮分别单独作用于猪油时,抗氧化效果明显。硒代蛋氨酸与黄酮复配时,猪油的POV值从高到低依次为硒代蛋氨酸与老鹰茶总黄酮复配组>黄酮对照组>空白组>单独加硒代蛋氨酸组>TBHQ组;亚硒酸钠与黄酮复配时,猪油的POV值从高到低依次为亚硒酸钠与老鹰茶总黄酮复配组>黄酮对照组>空白组>单独加亚硒酸钠组>TBHQ组;甲基硒代半胱氨酸与黄酮复配时,猪油的POV值从高到低依次为甲基硒代半胱氨酸与老鹰茶总黄酮复配组>黄酮对照组>空白组>单独加甲基硒代半胱氨酸组>TBHQ组。结果表明在本实验浓度范围内,硒与老鹰茶总黄酮对猪油氧化不具有协同增效作用,甚至促进了油脂的氧化。硒代蛋氨酸、甲基硒代半胱氨酸、亚硒酸钠和老鹰茶总黄酮单独作用于山桐子油时,具有明显的抗氧化效果。硒代蛋氨酸与黄酮复配使用时,山桐子油的POV值从高到低依次为空白组>黄酮对照组>硒代蛋氨酸与老鹰茶总黄酮复配组>单独加硒代蛋氨酸组>TBHQ组;甲基硒代半胱氨酸与黄酮复配使用时,山桐子油的POV值从高到低依次为空白组>甲基硒代半胱氨酸与老鹰茶总黄酮复配组>单独加甲基硒代半胱氨酸组>黄酮对照组>TBHQ组;亚硒酸钠与黄酮复配使用时,山桐子油的POV值从高到低依次为空白组>亚硒酸钠与老鹰茶总黄酮复配组>单独加亚硒酸钠组>黄酮对照组>TBHQ组。对比山桐子油的抗氧化效果,复配使用组的POV值比单组分更高,表明在本实验浓度范围内,硒与老鹰茶总黄酮不具有协同作用。以肝癌细胞为研究对象,三种硒化合物分别与老鹰茶总黄酮复配添加,对Hcclm3细胞的增殖抑制率均可达90%以上,表现出极高的抑癌活性。尤其是甲基硒代半胱氨酸在与老鹰茶总黄酮复合使用时,在极低的浓度如78.1μg/m L,抑制率仍可达83%。硒与老鹰茶总黄酮对Hcclm3细胞的迁移有明显抑制作用。结果显示硒与老鹰茶总黄酮协同对细胞的增殖和迁移均有抑制作用。结论:硒与老鹰茶总黄酮协同作为油脂的抗氧化剂,对山茶油具有较好的协同增效作用,对猪油和山桐子油作用不明显,需要改进复配方法。硒与老鹰茶总黄酮协同对肝癌细胞的增殖和迁移抑制效果显著。
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