不同剂量FTY720对内毒素致大鼠急性肺损伤的作用及机制研究

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目的:通过暴露法气管内滴注LPS致大鼠急性肺损伤,并经腹腔-一次性注射不同剂量FTY720干预,研究FTY720对炎症反应的抑制作用及其机制,探讨FTY720对LPS致大鼠急性肺损伤的治疗效果。方法:成年雄性SD大鼠120只,体重160~240g,随机分为对照组(LPS+NS组)和实验组(LPS+FTY组),实验组又分为FTY-0.1、FTY-0.2、FTY-0.5、FTY-1和FTY-2五个亚组。暴露法气管内滴注10mg/kg LPS致大鼠急性肺损伤后,实验组按组别腹腔注射0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg 的 FTY720,LPS+NS 组注射相等剂量的生理盐水。在处理后6h、24h及48h时间点行肺部CT及血气分析和肺组织病理学观察,采用ELISA法检测炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平、Western-blot 法检测肺组织 NF-κBp65、p-NF-κBp65 及 IκBα含量,并对所有结果进行统计学分析。结果:1、大鼠一般情况及PaO2和肺组织湿干比(W/D):与LPS+NS组比较,LPS+FTY组呼吸窘迫症状减轻,各组大鼠的PaO2和W/D改善,以低剂量组(FTY-0.1、FTY-0.2、FTY-0.5)改善程度较明显(P<0.05),且以FTY-0.1组更接近于正常(P>0.05)。2、肺组织病理及肺部CT影像:与LPS+NS组比较,低剂量组(FTY-0.1、FTY-0.2、FTY-0.5)的肺损伤评分降低(P<0.05),CT影像显示肺部炎症减轻,但FTY-1和FTY-2组效果不明显。3、ELISA法检测炎症细胞因子水平:与LPS+NS组比较,低剂量组(FTY-0.1、FTY-0.2、FTY-0.5)的炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平降低,且以FTY-0.5组最低(P<0.05)。4、肺组织蛋白免疫印迹:与LPS+NS组比较,低剂量组(FTY-0.1、FTY-0.2、FTY-0.5)肺组织的 p-NF-κBp65/NF-κBp65 比值降低,IκBα含量增加(P<0.05),NF-κB活化被抑制,且以FTY-0.5组作用效果更明显(P<0.05),但随着FTY720剂量的增加,FTY-1和FTY-2组的抑制作用减弱。结论:一次性腹腔注射FTY720对LPS诱导的急性肺损伤具有保护作用,以0.5mg/kg FTY720效果较好;其保护机制可能是通过抑制LPS诱导的NF-κB活化和调控Sphingosine-1-phosphate机制改善肺泡—毛细血管屏障功能障碍而实现的。
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