研究背景先天畸形、肿瘤、外伤等原因导致的软骨缺损是常见的临床疾病。由于软骨组织结构致密、组织内部无血管组织及软骨细胞密度较低等特点,软骨组织的愈合能力极其有限。传统的治疗方法包括自体软骨移植、自体软骨细胞移植、同种异体软骨移植和微骨折等,均存在一定缺点而使其临床应用受到限制。近年来,组织工程快速发展,有望成为治疗软骨缺损的有效手段。软骨脱细胞基质（Acellular Cartilage Matrix,ACM）通过将动物或人的软骨组织进行脱细胞后获得。作为一种在生物活性物质和空间结构上的双重仿生材料,ACM能够模拟天然软骨细胞外环境,为细胞的附着、增殖和营养成分的交换提供了足够的空间。同时,ACM具有良好组织相容性、低细胞毒性并具备一定机械力学性能。这使得软骨脱细胞基质成为理想的软骨组织工程材料,在修复软骨缺损上具有独特的优势。然而,由于软骨组织结构致密,脱细胞试剂在组织中扩散效率低,需要增加脱细胞试剂的作用时间和浓度来提高提高脱细胞程度,但脱细胞后的软骨组织机力学能会明显下降。且已有研究表明,改变ACM浓度能够改变支架孔隙率和孔径大小。因此,需要进一步研究来优化ACM支架的浓度和制备方案,探究ACM浓度对构建ACM支架在机械强度、孔径大小、孔隙率等方面的影响,为其构建组织工程软骨提供实验基础和参考。目的比较不同浓度的ACM对构建三维多孔支架的物理性能的影响;筛选出适合用于构建组织工程软骨的实验方案。材料与方法1、材料无骨关节病变的牛膝关节2个。2、方法 1)牛膝关节软骨的取材、冷冻、粉碎,获得软骨微粒。2)对软骨微粒进行胰酶消化、核酸酶消化、洗涤、清洗,获得牛关节软骨来源的ACM。3)以不同浓度ACM构建三维多孔支架:A组（100%）、B组（60%）、C组（30%）。4)对获得的支架材料进行大体观察、组织学评估、DNA定量检测、微观结构观察及测量、力学性能检测。5)对测量结果进行统计分析。结果1)组织学观察各组ACM支架中未见明显细胞形态,无细胞碎片残留。HE染色、天狼星红染色显示均为红染,表明胶原成分得到一定程度保留。2)DNA定量检测显示残余DNA浓度为1.103±0.174ng/mg,表明获得的ACM脱细胞彻底。3)扫描电镜结果显示A、B、C三组支架随着ACM浓度的增加,孔径明显减小,各组间差异明显。4)物理参数:A、B、C各组支架密度、屈服极限、杨氏模量与ACM浓度呈正相关;吸水率、孔隙率与ACM浓度呈负相关。结论以浓度为100%和60%的ACM构建的三维多孔支架具有良好的吸水率、孔隙率、孔径和接近正常软骨组织的力学性能,可作为选择方案用于构建组织工程软骨。