真核荧光表达载体pEGFP-C3-SOX1的构建及瞬时表达

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背景与目的 近年来,干细胞移植治疗中枢神经系统损伤及变性疾病日益受到医学界的重视。用于移植的干细胞主要包括胚胎干细胞、神经干细胞和间充质干细胞,其中间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)具有取材方便,易于体外培养扩增、不涉及伦理道德及不具有免疫排斥反应等优点,因而被认为是干细胞移植较为理想的种子细胞。 骨髓来源的间充质干细胞具有多向分化潜能,在实验条件下可以向骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞及心肌细胞分化。近来研究表明,用多种方法还可在体内外诱导MSCs分化为神经样细胞。然而,应用传统方法诱导MSCs向神经细胞分化存在分化率低及不稳定等缺点,制约了其临床应用。寻找一种高效、稳定的神经诱导方法将会极大促进MSCs在神经移植领域的应用。而探索MSCs定向神经分化的分子调控机制,找到神经分化的关键基因或因子则是解决这一难题的突破口。 研究发现,SOX1(SRY-related HMG-box genel)在胚胎神经发育的较早时期表达并发挥了重要作用,被认为与神经命运的决定和分化有关。过表达SOX1基因可促进多种胚胎干细胞和神经干细胞向神经方向分化,而SOX1对于骨髓间充质干细胞的神经分化有无影响,国内外并没有进行相关研究。因此,本实验构建携带增强型荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-C3-SOX1并转染Eca-9706细胞,观察pEGFP-C3-SOX1转染效果及细胞瞬时表达情况,为进一步研究SOX1在骨髓间充质干细胞神经分化中的作用奠定基础。
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