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沙门菌（Salmonella）是一种重要的人畜共患病的肠道致病菌,严重威胁人和动物的健康和生命安全,一直是公共卫生学和兽医学讨论的热点话题。近年来随着抗菌药物的广泛使用和滥用,鸡源沙门菌对抗菌药物的抗性快速传播,尤其呈多重耐药的菌株更加明显。本试验的目的是研究鸡源沙门菌的药物敏感性特征、耐药基因检测及其流行性特征,以及1株耐四环素类抗生素的tetM基因的上下游环境。通过细菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因检测,研究鸡源沙门菌多重耐药性;通过ERIC-PCR研究产超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamase,ESBLs）和AmpC酶的鸡源沙门菌之间的进化关系;通过接合试验、质粒提取、质粒不相容群分析、Overlapping PCR分析tetM基因的上下游环境。1、2016年9月至2017年12月从河南、湖北、山西、江西、湖南、安徽、陕西等7个省份合作养鸡场中采集疑似沙门菌感染的病死鸡的肝脏样品860份,参考食品卫生卫生学检验沙门菌检验（GB/T4789.4-2010）标准,具体通过SS琼脂、科玛嘉沙门菌显色培养基进行细菌初筛,再通过16S rRNA和特有侵袭基因（invA）扩增、测序进行鉴定,最终分离出156株鸡源沙门菌。2、根据CLSI推荐的标准,采用微量肉汤稀释法对156株鸡源沙门菌分离株进行了13种常用抗菌药物的药物敏感性试验,结果显示,分离株对阿莫西林、土霉素、磺胺、多西环素的耐药率最高,分别为100%、99%、97%和87%;其次为氟苯尼考、恩诺沙星、庆大霉素,耐药率分别为57%、49%、49%;对头孢噻呋、头孢喹肟、喹乙醇、痢菌净较为敏感,耐药率为27%、26%、22%、15%;对阿米卡星和黏菌素最敏感,敏感率为97%、99%;并且分离株全部为多重耐药株,最低对3种抗菌药物耐药,最高对11种抗菌药物耐药,87%沙门菌对5种及其以上抗菌药物耐药,说明沙门菌多重耐药株较多。3、用PCR方法扩增相应的耐药基因,并对部分分离株进行接合试验。耐药基因扩增显示,对于β-内酰胺类耐药基因,10株产CTX型超广谱β-内酰胺酶,其中5株为CTX-M-65,3株为CTX-M-14,2株为CTX-M-55;blaOXA-1检出阳性29株,blaOXA-2检出阳性18株,blaTEM检出阳性41株;对于产AmpC酶的鸡源沙门菌,4株为blacmy-2,未检测到blaSHV。对于四环素类耐药基因,tetA和tetB检出率较高,分别为51%、38%,tetC和tetM检出率较低,分别只检测到8株和1株,未检测到tetD。对于氨基糖苷类耐药基因,只检测到rmtB,检出率为3%。对于氟苯尼考耐药基因,floR检出率为35%。对于喹乙醇通过质粒介导的多药外排泵耐药基因,oqxA和oqxB检出率均为13%。磺胺耐药基因sul 1检出率最高,高达96%。质粒介导喹诺酮类一系列耐药基因均未检测出。接合试验显示,成功获得1株含tetM的接合子,质粒类型为FIA、FIB、FII。4、在ESBLs中,CTX-M型ESBLs较常见,也呈多样流行,blaCTX-M基因的下游因亚族不同而存在差异,CTX-M-1族大多为orf477,而CTX-M-9族大多为IS903,而上游普遍存在ISECp1。5、通过定位PCR可知,tetM基因上游为转座基因tnpA1、Tn916的不完整orf13阅读框片段,下游与不完整的转座基因tnpR相连。