【摘 要】
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选择合适的树脂是分离纯化虫草素的关键。通过对4种大孔吸附树脂HPD722、HPD750、AB-8、RESIN-Ⅱ进行虫草素的静态吸附和解析特性研究,最终选择RESIN-Ⅱ树脂用于虫草素的分离
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选择合适的树脂是分离纯化虫草素的关键。通过对4种大孔吸附树脂HPD722、HPD750、AB-8、RESIN-Ⅱ进行虫草素的静态吸附和解析特性研究,最终选择RESIN-Ⅱ树脂用于虫草素的分离提取。RESIN-Ⅱ大孔树脂静态吸附6h可达到充分的吸附效果,用50%乙醇解析120min达到解析平衡。影响RESIN-Ⅱ大孔树脂对虫草素吸附性能的因素有pH和流速;最佳吸附条件为pH9,吸附流速2BV/h,该树脂对虫草素的吸附量可达到16.5mg/g。影响RESIN-Ⅱ大孔树脂对虫草素解析性能的因素有pH、乙醇体积分数和流速;最佳解析条件为pH9-pH12,50%乙醇以3BV/h的流速洗脱,RESIN-Ⅱ大孔树脂对虫草素的解析率可达到95%以上。比较虫草素提取过程中前醇沉工艺与后醇沉工艺。由试验可知,后醇沉可节约大量乙醇;虽然前醇沉的虫草素得率较高,但后醇沉沉淀下来的虫草素可以回收重新分离纯化。因此用后醇沉的方法纯化虫草素而损失的虫草素实际上并不比前醇沉高多少。为了更好的开发利用蛹虫草资源,减少乙醇用量,采用后醇沉的方法分离提取人工蛹虫草固体培养基残基中的虫草素,是十分必要的。后醇沉最适工艺:将洗脱液浓缩20倍,加入无水乙醇使终浓度达到80%并放置9h,离心取上清液备用;取沉淀下来的杂质,以每克沉淀加入2m180%乙醇重新溶解,离心取上清液,过柱重新分离纯化。比较RESIN-Ⅱ大孔吸附树脂和CATION阳离子交换树脂、ANION阴离子交换树脂联用分离提取虫草素,结果表明两种方法均可制得虫草素晶体。虽然RESIN-Ⅱ大孔吸附树脂分离色素的能力较差,导致虫草素结晶率比CATION ANION树脂联用法略低;但RESIN-Ⅱ大孔吸附树脂的理化性质稳定,吸附量大,解析率高,重要的是,该方法能减少大量乙醇消耗,因此该树脂是分离纯化虫草素的理想选择。
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