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蜂王幼虫是生产蜂王浆的副产物,我国蜂王幼虫资源丰富,是一种优质的昆虫蛋白质资源,长期食疗实践验证了其保健作用,开发潜力巨大。然而目前蜂王幼虫保健作用的物质基础不明确导致幼虫开发停滞在较低水平。论文以蜂王幼虫为研究对象,研究其水溶性蛋白质组成、结构和生物活性之间的构效关系,为幼虫开发提供科学依据。主要结果如下：(1)蜂王幼虫水溶性蛋白质纯化与鉴定。对蜂王幼虫水溶性蛋白质中高丰度蛋白质和低分子量蛋白质进行鉴定,并采用离子交换、凝胶层析和反相色谱法纯化了高丰度蛋白质。结果表明,蜂王幼虫蛋白质以水溶性蛋白质为主(33.6g/100g干重),通过纯化获得两个主要蛋白质queen larvae protein-1(QLP-1)和queen larvae protein-2(QLP-2),质谱鉴定为MRJP1与其降解产物(35kDa)和MRJP2及其降解产物(40kDa)。蜂王幼虫水溶性低分子量蛋白质的分子量分布范围为5-20kDa,从中鉴定出5种蜂王浆主蛋白降解产物、3种抗氧化相关蛋白质、2种抗菌蛋白和17种幼虫发育相关蛋白质等四类蛋白质。(2)蛋白质结构表征。QLP-1和QLP-2经过凝胶色谱分子量分布测定,分子量分别为270kDa和40kDa,native-PAGE显示均为单一条带,QLP-1和QLP-2二级结构以β-折叠为主(33%以上),a-螺旋比例较低,处于相对稳定的构象。与从蜂王浆中纯化的MRJP1和MRJP2相比,QLP-1和QLP-2的β-折叠结构比例升高,分子结构更舒展。蜂王幼虫脂类组成的结果表明,蜂王幼虫中含有丰富磷脂和辅酶Q10,蜂王幼虫和蜂王浆中甾醇的种类和含量极为相似,通过对纯化的QLP-1蛋白质中甾醇的测定,推断QLP-1和MRJP1是甾醇载体蛋白。(3)蛋白质生物活性。采用凝胶渗透色谱和Tricine-SDS-PAGE电泳考察了QLP-2在模拟胃肠消化的水解过程,在水解度增加的同时,小分子量肽段迅速形成,水解产物ACE抑制率不断提高,酶解3h后半数抑制浓度IC50值达0.21mg/mL。采用凝胶色谱、RP-HPLC分离出一种ACE抑制肽Leu-Leu-Lys-Pro-Tyr(632.40Da),IC50值为54.9μM。同时分离出两种抗氧化肽Glu-Trp (333.14Da)和Asn-Tyr-Pro-Phe (539.24Da),对DPPH自由基清除的半数有效浓度EC50值分别为0.19和1.47mg/mL。两种活性肽不仅对ABTS和羟自由基均有很好的清除作用,还具有很强的还原力。通过小鼠模型筛选了幼虫中具有增强免疫活性的蛋白质。灌胃给药后QLP-1显著提高正常小鼠脾指数和胸腺指数(P<0.05)；同时,QLP-1(240mg·kg-1剂量)可显著增强免疫抑制小鼠的碳廓清能力,并且使DTH小鼠耳肿胀度显著增加(P<0.05),使DTH小鼠血清中IFN-γ和TNF-α浓度显著增加(P<0.05)。结果表明QLP-1能够提高正常小鼠细胞免疫的功能,增加巨噬细胞和NK细胞的活性,诱导IFN-γ和TNF-a的产生。