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为了保障养殖环境的稳定和食品安全的可控,陆基养殖是未来滤食性贝类养殖的一种发展趋势,但该模式需要大量的天然饵料,它的首要限制因素是缺乏来源稳定、营养适宜且可批量生产的饵料。因此,研发营养适宜的配合饲料决定着整个陆基养殖的成败。本论文以课题组原有饲料配方D4为基础,首先根据养殖效果筛选了饲料的适宜蛋白源,并基于代谢组学探究了不同蛋白源饲料对马氏珠母贝代谢的影响;然后筛选了饲料的适宜糖类/蛋白水平,并基于代谢组学探究了不同糖类/蛋白水平饲料对马氏珠母贝代谢的影响;在此基础上,添加不同水平的维生素D3进行育珠试验(以自然海区育珠为对比),优化出适宜马氏珠母贝育珠的配合饲料。主要结果如下:1、为了筛选马氏珠母贝微胶囊饲料适宜的蛋白源,本章分别以小球藻粉、螺旋藻粉、酵母粉、豆粕和玉米蛋白粉为主要蛋白源,配制了等氮(35%粗蛋白)等脂(10%粗脂肪)的配合饲料(D5系列:D5-1、D5-2、D5-3、D5-4和D5-5),进行养殖实验,比较了不同蛋白源饲料对马氏珠母贝生长、免疫力和抗氧化能力及矿化能力的影响。结果显示:D5-1、D5-2、D5-3和D5-4组生长性状的绝对增长率(AGR)显著高于D5-5组(P<0.05),而前四组组间生长性状的AGR无显著性差异(P>0.05)。D5-1、D5-2、D5-3和D5-4组的蛋白酶、淀粉酶、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性活力显著高于D5-5(P<0.05)。D5-1、D5-2、D5-3和D5-4组的免疫相关基因SOD、GPx、CAT、热休克蛋白(HSP)70和HSP90 mRNA和矿化相关基因nacrein、pif177和pearlin mRNA的表达水平显著高于D5-5组(P<0.05)。因此,小球藻粉、螺旋藻粉、酵母粉和豆粕作为马氏珠母贝配合饲料蛋白源养殖效果优于玉米蛋白粉。2、为了探讨不同蛋白源饲料对马氏珠母贝代谢的影响,分别以饲料D5-3和D5-5为实验组进行陆基养殖,以自然海区养殖为对照组,基于气相色谱(GC)-飞行时间(TOF)/质谱(MS)代谢组学比较了马氏珠母贝的代谢差异。D5-3组和D5-5组的比较结果显示:D5-3组的存活率和生长性状的AGR显著高于D5-5组(P<0.05);在鉴定到的126个特定代谢物(与质谱检测峰的匹配度打分(Similarity)≥700)中,35个差异显著(VIP>1且P<0.05);基于差异代谢物的代谢通路富集分析推测肌醇磷酸代谢、抗坏血酸和阿尔达酸代谢、苯丙氨酸代谢和酪氨酸代谢等通路代谢物的差异引起了以玉米蛋白粉为主要蛋白源的饲料组与以酵母粉为主要蛋白源的饲料组贝体的生长差异。D5-3组与CG组的比较结果显示:D5-3组的存活率显著高于CG组(P<0.05),两组总重的AGR无显著差异(P>0.05),但CG组的壳长、壳宽和壳高的AGR显著高于D5-3组(P<0.05);在鉴定到的125个代谢物(Similarity≥700)中,48个差异显著(VIP>1且P<0.05);基于差异代谢物的代谢通路富集分析推测以酵母粉为主要蛋白源的饲料的营养不全面可能影响了贝体的半胱氨酸和蛋氨酸代谢、硫代谢及淀粉和蔗糖代谢,导致了其生长不如海区自然养殖,并且相关分析建议优化饲料的碳水化合物水平。3、为了筛选饲料适宜的糖类/蛋白水平,本章配制了不同糖类/蛋白水平的等脂等能的饲料(D6系列:D6-1(C30P40)、D6-2(C35P35)、D6-3(C40P30)、D6-4(C45P25)和D6-5(C50P20)),设置了5个实验组和2个对照组(CG1组投喂酵母粉和小球藻粉的混合物,CG2组为自然海区养殖)。养殖60天后,结果显示:D6-4组的存活率和AGR最高;D6-4组淀粉酶、蛋白酶、AKP、ACP、SOD、CAT、GPx和酚氧化酶的活性显著高于其他实验组和CG1组(P<0.05),D6-4组的丙二醛含量显著低于其他实验组和CG1组(P<0.05),此外,D6-4组的总抗氧化能力显著高于其他实验组(P<0.05)。综上,C45P25是马氏珠母贝配合饲料适宜的糖类/蛋白水平。为了探讨饲料糖类/蛋白水平对马氏珠母贝代谢的影响,本章比较了D6-4组和D6-1组马氏珠母贝的代谢差异。鉴定到的287个代谢物中80个差异显著,基于差异代谢物的代谢通路富集分析推测淀粉和蔗糖代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢和甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢等通路代谢物的变化引起两组马氏珠母贝的生长差异。4、为了优化出适宜育珠的配合饲料,本章基于优化的适宜蛋白源及糖类/蛋白水平,添加不同水平(0、500、1000、3000、10000 IU/kg)VD3,配制了饲料D7系列(D7-1、D7-2、D7-3、D7-4和D7-5),5个实验组进行陆基育珠实验,对照组CG为自然海区育珠。结果显示:30天后D7-3组育珠贝存活率最高,且显著高于D7-5组和CG组(P<0.05);D7-3组的AKP、ACP、CAT、SOD和溶菌酶(LYS)活力最高;且D7-3组的AKP和CAT活力显著高于D7-4、D7-5和CG组(P<0.05);D7-3组的ACP活力显著高于D7-4和CG组(P<0.05);D7-3组的SOD和LYS活力显著高于其他组(P<0.05)。育珠137天时,D7-3组的存活率、留核率和优质珠率最高,且留核率显著高于D7-2、D7-4、D7-5和CG组(P<0.05),优质珠率显著高于D7-1和D7-5组(P<0.05);D7-3和CG组珍珠的珍珠层厚度和珍珠沉积率显著高于其他实验组(P<0.05),而两组间无显著性差异(P>0.05)。基于育珠贝的免疫和育珠性状,适宜马氏珠母贝育珠的饲料VD3添加水平为1000 IU/kg。该研究结果可为珍珠贝的陆基育珠奠定理论基础。