316L医用不锈钢表面磷脂/多肽仿生多功能涂层的构建及评价

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316L不锈钢具有良好的力学性能和耐腐蚀性能,除此之外也拥有良好的生物相容性,这就使得316L不锈钢能够作为生物材料且广泛应用于生物医学领域。但当其作为心血管植入器械材料,在服役期间存在材料表面金属离子的溶出以及表面血栓等问题,因此需要改善材料的血液相容性,并在此基础上调控其与植入环境周围组织之间的相互作用。2-甲基丙烯酰氧乙基磷酸胆碱(MPC),是磷脂分子的重要组成成分,它由亲水性的头部磷酸胆碱和疏水性的尾部甲基丙烯酸酯组成,其中磷酸胆碱能够起到抗凝血的作用,甲基丙烯酸酯中的乙烯基能够利于MPC与其他材料聚合为具有不同功能的磷脂聚合物,通过其优良的血液相容性满足不同血液接触材料的各方面需求。本论文以316L不锈钢作为基底材料,为了改善其血液相容性并达到利于内皮化的目的,设计并合成了几种磷脂仿生聚合物,实现了将MPC、MA(甲基丙烯酸)、DMA(多巴胺甲基丙烯酰胺)三种不同单体聚合为四种不同组成的的磷脂聚合物(PDMMPC5-Ⅰ、PDMMPC5-Ⅱ、PDMMPC7-Ⅰ、PDMMPC7-II)。首先是通过多巴胺与甲基丙烯酸酐之间的反应来制备DMA单体,其次是通过三种单体之间的无规共聚反应得到相应磷脂聚合物。此外通过对制备成功的PDMMPC7-I进行氧化而得到聚合物POMMPC,最终得到五种磷脂聚合物。上述四种磷脂聚合物都包含有PC基团、羧基和邻苯二酚基团,通过邻苯二酚的粘附作用能够将磷脂聚合物固定在基底材料上,PC基团则具有很好的抗凝血作用,利用羧基可以与层粘连蛋白(Ln)进行接枝,并通过后续自组装POMMPC和多肽分子((RK-13)),最终改善316L不锈钢材料的生物相容性。利用红外光谱(FTIR)、核磁共振(1H NMR)、紫外可见光谱(UV-Vis)等表征手段对DMA单体以及四种磷脂聚合物的结构进行了表征分析。分析结果表明,反应过程中的第一步产物DMA单体合成成功,收率约为70%。第二步通过三种单体成功合成四种不同组成的磷脂聚合物,其中聚合物中摩尔单体聚合比例与反应投料比接近。通过QCM对四种磷脂聚合物的固定量检测,结果表明PDMMPC5-I拥有更高的DMA摩尔单体比,能够达到更高的表面固定量。稳定性实验表明四种磷脂聚合物都能够稳定牢固地固定在基底材料表面,经过PBS缓冲溶液2个月的浸泡后未出现大面积的脱落。基底涂层的血液相容性结果表明,PDMMPC7-I和PDMMPC5-I都具有比较好的抗凝血性能,但综合考虑到PDMMPC5-I含有更多的邻苯二酚基团,理论上可以更牢固地粘附与基底,故选择作为改性材料的基底涂层。在确定基底涂层后,以后续分子之间的自组装行为来实现层粘连蛋白/POMMPC/(RK-13)改性涂层的构建,通过XPS(X射线光电子能谱)、WCA(水接触角)、QCM等表征方法,可以验证自组装涂层构建成功。以血液相容性和细胞相容性作为生物相容性初步验证,改性后的材料表面能够降低血小板的激活程度,并在一定程度上利于内皮细胞和内皮祖细胞的粘附与增殖,达到相对较理想的生物化表面。
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