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全氟类化合物是一类人工合成的新兴有机化合物，具有较高的热稳定性及化学稳定性，同时具有极强的抗水解、抗光解、耐酸、耐碱能力。全氟类化合物疏水、疏油的特殊理化性质使其被广泛应用在众多领域，如一次性食品包装、炊具涂料、户外用品等消费品，以及消防泡沫、抛光剂、涂料等生产加工领域，自使用至今已造成了严重的环境污染。该类物质可以在多种环境介质中被检出，如土壤、水体及大气沉降物等。人类生活在自然环境中，会以多种方式暴露于全氟类化合物。人体外周血、脐血、甚至母乳中均可检出该类物质，其造成的健康影响受到越来越多的关注。全氟类化合物所造成健康损害主要有器官毒性、免疫毒性、内分泌毒性、生殖发育毒性等方面，而有关其对乳腺癌的影响受到了越来越多的关注。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，据世界卫生组织国际癌症研究中心估计，2018年全球乳腺癌新发病例约为208万例，新发乳腺癌死亡约为62万例，高居女性恶性肿瘤发病及死亡顺位的首位，每4位女性恶性肿瘤患者中就有一位为乳腺癌患者。乳腺癌的发病率逐年增加，所造成的疾病负担逐年加重，而环境因素作为乳腺癌的危险性因素之一，受到了广泛的关注。目前，有关全氟类化合物与乳腺癌关系的研究较为有限，人群流行病学研究仅10余篇，且结论尚不一致，因此仍需要大量研究来探索全氟类化合物与乳腺癌的关系。此外，已发表的有关二者间关系的研究均来自欧美等发达国家，考虑到我国人口基数庞大，污染分布和社会人口学分布与发达国家并不一致，且乳腺癌发病率增长迅速，所以，基于我国人群探索全氟类化合物与乳腺癌的关系尤为必要。
目的：
1.评估典型全氟类化合物PFOA、PFNA、PFDA、PFUdA、PFDoA、PFTrDA、PFTeDA、PFHxS、PFHpS、PFOS、P3MHpS、P4MHpS、P5MHpS、P6MHpS、P45DMHxS、11CL-PF3OUdS、9CL-PF3ONS在一般人群中的内暴露水平；
2.探索典型全氟类化合物与乳腺癌之间的关系；
3.探索典型全氟类化合物与不同分子分型、受体分型乳腺癌及乳腺癌不同特征(肿瘤大小、淋巴转移情况等因素)之间的关系；
4.探索典型全氟化合物PFOA对2种乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231的影响及其中涉及的分子机制。
方法：
1.采用病例对照研究的设计方法，选取前往天津市肿瘤医院就诊，进行乳腺癌筛查、诊断、治疗的人群为研究对象，选取病例380例，对照798例。采用标准化问卷收集参与者的基本信息，收集外周血15mL冻存备以检测。应用超高效液相色谱-质谱连用(UHPLC-MS)的方法检测人群血清全氟类化合物浓度水平，经震荡萃取、氮吹浓缩、纯化等前处理后，采用SHIMADZUNexeraUHPLCLC-30A超高效液相色谱仪与ABSCIEXTripleQuadTM500三重四级杆质谱检测器组合系统对目标全氟类化合物进行定量检测，进行研究人群基本特征及17种全氟类化合物分布的统计描述以及初步的统计分析。
2.根据是否患有乳腺癌，将全氟类化合物以连续性变量以及等级变量形式构建二元非条件Logistic回归模型，探索全氟类化合物与乳腺癌之间的关系；将全氟类化合物按照结构式分为三个子类(PFCAs、PFSAs、PFSAisomers)，将以上三大类物质按照连续性变量以及等级变量形式构建二元非条件Logistic回归模型，探索子类全氟化合物与乳腺癌之间的关系。
3.基于临床病历收集病例组人群乳腺癌相关资料，使用多重Logistic回归以及二元Logistic回归探索全氟类化合物与不同分子分型、受体分型乳腺癌以及乳腺癌各特征之间的关系。
4.使用PFOA对2种人类乳腺癌细胞MCF7以及MDA-MB-231进行24h染毒处理，随后采用CCK-8细胞活性实验，流式细胞仪细胞周期实验，Transwell细胞迁移、侵袭实验，以及qRT-PCR实验，阐明PFOA对乳腺癌细胞影响的潜在分子机制。
结果：
1.本研究人群普遍暴露于多种全氟类化合物，内暴露在国内外一般人群中处于中高水平，血清浓度水平最高的全氟类化合物为PFOS、9CL-PF3ONS以及PFOA，其中位暴露水平分别为12.53(IQR：7.95，18.20)ng/mL、9.49(IQR：5.02，15.42)ng/mL以及3.27(IQR：2.23，4.94)ng/mL。
2.PFOA、PFDA、PFOS在作为连续变量时为乳腺癌的危险因素，其比值比(OR)分别为1.483(1.326，1.659)、1.619(1.194，2.195)及1.080(1.050， 1.111)，其中PFOA和PFDA在作为等级变量时同样为乳腺癌的危险因素，二者的OR值随暴露等级的增加而逐渐增加；PFNA、PFHxS、P3MHpS在作为连续变量时为乳腺癌可能的保护因素，其OR值分别为0.546(0.383，0.778)、0.479(0.322，0.712)及0.098(0.046，0.210)，其中PFHxS、P3MHpS在作为等级变量时同样为乳腺癌可能的保护因素，二者OR值随暴露等级的增加而逐渐减小。
3.相对于本研究中LuminalA，LuminalB及Basal型乳腺癌，PFOA对HER2型乳腺癌的影响具有统计学意义；PFOA、P4MHpS对ER阴性乳腺癌的影响，差异具有统计学意义；PFOA对PR阳性乳腺癌的影响，PFDA与P5MHpS对PR阴性乳腺的影响，差异具有统计学意义。PFTeDA暴露更易导致乳腺癌患者肿瘤直径较大，11CL-F3OUdS暴露更易导致乳腺癌患者淋巴受累较重，但机制未明。
4.低剂量PFOA可以增强MDA-MB-231的细胞活力，高剂量的PFOA可以导致MDA-MB-231和MCF7细胞活力显著下降，呈明显的剂量反应关系；PFOA显著增加了MDA-MB-231和MCF7细胞迁移及侵袭水平，呈明显的剂量反应关系；对于MDA-MB-231细胞，PFOA可能通过影响MAPK1以及MMP2促进细胞迁移及侵袭的发生；对于MCF7细胞，PFOA可能通过影响ER-α、GPER、PI3K、以及SLUG来促进细胞迁移及侵袭的发生。
结论：
在我国人群中，部分典型全氟类化合物是乳腺癌的危险因素，不同的全氟类化合物对各分型乳腺癌或乳腺癌特征的影响各异，提示其致病机制并不相同；PFOA对不同分子分型乳腺癌侵袭、迁移的促进作用机制不同，其中可能涉及到ER、GPER、ERK1/2与PI3K-AKT信号通路，但具体机制仍需探索。本文为全氟类化合物导致乳腺癌的发生、发展提供了新的流行病学及分子证据，为乳腺癌的预防及靶点治疗提供新的研究基础。
目的：
1.评估典型全氟类化合物PFOA、PFNA、PFDA、PFUdA、PFDoA、PFTrDA、PFTeDA、PFHxS、PFHpS、PFOS、P3MHpS、P4MHpS、P5MHpS、P6MHpS、P45DMHxS、11CL-PF3OUdS、9CL-PF3ONS在一般人群中的内暴露水平；
2.探索典型全氟类化合物与乳腺癌之间的关系；
3.探索典型全氟类化合物与不同分子分型、受体分型乳腺癌及乳腺癌不同特征(肿瘤大小、淋巴转移情况等因素)之间的关系；
4.探索典型全氟化合物PFOA对2种乳腺癌细胞MCF7和MDA-MB-231的影响及其中涉及的分子机制。
方法：
1.采用病例对照研究的设计方法，选取前往天津市肿瘤医院就诊，进行乳腺癌筛查、诊断、治疗的人群为研究对象，选取病例380例，对照798例。采用标准化问卷收集参与者的基本信息，收集外周血15mL冻存备以检测。应用超高效液相色谱-质谱连用(UHPLC-MS)的方法检测人群血清全氟类化合物浓度水平，经震荡萃取、氮吹浓缩、纯化等前处理后，采用SHIMADZUNexeraUHPLCLC-30A超高效液相色谱仪与ABSCIEXTripleQuadTM500三重四级杆质谱检测器组合系统对目标全氟类化合物进行定量检测，进行研究人群基本特征及17种全氟类化合物分布的统计描述以及初步的统计分析。
2.根据是否患有乳腺癌，将全氟类化合物以连续性变量以及等级变量形式构建二元非条件Logistic回归模型，探索全氟类化合物与乳腺癌之间的关系；将全氟类化合物按照结构式分为三个子类(PFCAs、PFSAs、PFSAisomers)，将以上三大类物质按照连续性变量以及等级变量形式构建二元非条件Logistic回归模型，探索子类全氟化合物与乳腺癌之间的关系。
3.基于临床病历收集病例组人群乳腺癌相关资料，使用多重Logistic回归以及二元Logistic回归探索全氟类化合物与不同分子分型、受体分型乳腺癌以及乳腺癌各特征之间的关系。
4.使用PFOA对2种人类乳腺癌细胞MCF7以及MDA-MB-231进行24h染毒处理，随后采用CCK-8细胞活性实验，流式细胞仪细胞周期实验，Transwell细胞迁移、侵袭实验，以及qRT-PCR实验，阐明PFOA对乳腺癌细胞影响的潜在分子机制。
结果：
1.本研究人群普遍暴露于多种全氟类化合物，内暴露在国内外一般人群中处于中高水平，血清浓度水平最高的全氟类化合物为PFOS、9CL-PF3ONS以及PFOA，其中位暴露水平分别为12.53(IQR：7.95，18.20)ng/mL、9.49(IQR：5.02，15.42)ng/mL以及3.27(IQR：2.23，4.94)ng/mL。
2.PFOA、PFDA、PFOS在作为连续变量时为乳腺癌的危险因素，其比值比(OR)分别为1.483(1.326，1.659)、1.619(1.194，2.195)及1.080(1.050， 1.111)，其中PFOA和PFDA在作为等级变量时同样为乳腺癌的危险因素，二者的OR值随暴露等级的增加而逐渐增加；PFNA、PFHxS、P3MHpS在作为连续变量时为乳腺癌可能的保护因素，其OR值分别为0.546(0.383，0.778)、0.479(0.322，0.712)及0.098(0.046，0.210)，其中PFHxS、P3MHpS在作为等级变量时同样为乳腺癌可能的保护因素，二者OR值随暴露等级的增加而逐渐减小。
3.相对于本研究中LuminalA，LuminalB及Basal型乳腺癌，PFOA对HER2型乳腺癌的影响具有统计学意义；PFOA、P4MHpS对ER阴性乳腺癌的影响，差异具有统计学意义；PFOA对PR阳性乳腺癌的影响，PFDA与P5MHpS对PR阴性乳腺的影响，差异具有统计学意义。PFTeDA暴露更易导致乳腺癌患者肿瘤直径较大，11CL-F3OUdS暴露更易导致乳腺癌患者淋巴受累较重，但机制未明。
4.低剂量PFOA可以增强MDA-MB-231的细胞活力，高剂量的PFOA可以导致MDA-MB-231和MCF7细胞活力显著下降，呈明显的剂量反应关系；PFOA显著增加了MDA-MB-231和MCF7细胞迁移及侵袭水平，呈明显的剂量反应关系；对于MDA-MB-231细胞，PFOA可能通过影响MAPK1以及MMP2促进细胞迁移及侵袭的发生；对于MCF7细胞，PFOA可能通过影响ER-α、GPER、PI3K、以及SLUG来促进细胞迁移及侵袭的发生。
结论：
在我国人群中，部分典型全氟类化合物是乳腺癌的危险因素，不同的全氟类化合物对各分型乳腺癌或乳腺癌特征的影响各异，提示其致病机制并不相同；PFOA对不同分子分型乳腺癌侵袭、迁移的促进作用机制不同，其中可能涉及到ER、GPER、ERK1/2与PI3K-AKT信号通路，但具体机制仍需探索。本文为全氟类化合物导致乳腺癌的发生、发展提供了新的流行病学及分子证据，为乳腺癌的预防及靶点治疗提供新的研究基础。