不同浓度的富血小板血浆对兔跟腱愈合的影响研究

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目的:利用自体富血小板血浆(Platele rich plasma,PRP)治疗兔跟腱断裂,观察跟腱形态结构的修复、生长因子的表达以及生物力学性能的恢复,探讨不同浓度的PRP对肌腱愈合的影响,为PRP应用在肌腱修复的临床实践提供理论基础。方法:取健康成年新西兰大白兔48只,体重2.5~3.0 kg,于兔耳中心动脉取血,采用Landesberg二次离心法制备PRP,并将上清液作为稀释剂,制备浓度分别为40%、70%、100%的PRP;对全血及PRP进行血小板计数。将兔右后肢跟腱横行切断制备跟腱断裂模型,随机分为实验组(A组,B组,C组)及对照组(D组),每组12只。实验组:于跟腱切断后即刻将40%、70%和100%PRP分别涂抹于A、B、C三组兔子跟腱两断端;对照组:等量的生理盐水。术后观察实验动物一般情况,于术后分别在2周、4周兔进行安乐死,取跟腱标本行组织学及免疫组织化学观察,并进行成纤维细胞计数、胶原纤维含量及TGF-β1表达水平检测,最后进行生物力学检测。结果:实验动物均存活至实验完成,切口愈合良好。组织学观察示,HE染色:术后2周,B、C组与对照组成纤维细胞计数相比,差异均有统计学意义(P<0.05),并且C组高于B组(P<0.05),A组与对照组成纤维细胞计数比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后4周,C组与对照组成纤维细胞计数比较,差异均有统计学意义(P<0.05),B、A组与对照组成纤维细胞计数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Masson染色:术后2周和4周,B、C组与对照组胶原纤维含量比较,差异均有统计学意义(P<0.05),并且C组高于B组(P<0.05),A组与对照组胶原纤维含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色观察示,术后2周,B、C组与对照组TGF-β1表达比较,差异均有统计学意义(P<0.05),并且C组高于B组(P<0.05),A组与对照组TGF-β1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后4周,实验组与对照组TGF-β1表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。生物力学测试:术后4周,C组最大抗拉力高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),A、B组最大抗拉力与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PRP可促进兔损伤跟腱的修复,改善其愈合质量,PRP浓度为100%时作用效果较好。
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