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肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）在常见的恶性肿瘤中居于第五位，是第三大肿瘤死亡原因。我国每年HCC的发病率约占世界55％，HCC已成为我国第二位恶性肿瘤致死原因。由于HCC发病机制尚不清楚，目前抗肿瘤药物不良反应大，临床上迫切需要寻找高效、低毒的有效物质来抑制HCC细胞侵袭和转移，从而给予更好的干预。在培养的HCC细胞和人HCC组织中COX-2的表达与Akt磷酸化正相关。体内外实验表明，COX-2参与了抑制caspases3和caspases9的活性、降低p53和Bax的表达、增强Akt的活性，可能有抑制肝细胞的调亡的作用。这些现象提示COX-2的表达与肿瘤的发生、发展有着密切关系。而PGE2作为COX-2的催化产物，在HCC中的水平随着COX-2水平的升高而升高。已知PGE2通过激活细胞表面的PGE2受体（prostaglandin E receptor, EP），与不同的G蛋白偶联，启动下游信号通路而发挥其对细胞功能的调节作用。研究发现，在HCC中EP1的表达最为丰富。表没食子儿茶素没食子酸酯（（-）-Epigallocatechin-3-gallate, EGCG）是绿茶或一些天然药物中的活性成分，具有抑制肿瘤细胞增殖的活性。EGCG具有较强的抗氧化活性，能够保护细胞和DNA免受损害，并有抗辐射和紫外线等生物学功能。近年来，大量实验证明EGCG能干扰癌细胞生存所需的信号传递，如EGCG能与Bcl-2、Bcl-xL的疏水域紧密地结合，有效抑制抗凋亡Bcl-2家族成员，促进肿瘤细胞凋亡。EGCG降低某些致癌物质的活力、提高癌细胞对化疗的敏感性等作用。结合以上背景资料，探讨PGE2/EP1信号通路在HCC发展中的作用和EGCG对其的影响，寻求HCC治疗新靶点以及为EGCG用于HCC的治疗提供实验依据。目的：观察HCC患者血清中PGE2水平及EP1在HCC细胞和人肝细胞中的表达，分析PGE2及EP1激动剂ONO-DI-004对HCC增殖和移行的相关性，研究EGCG对PGE2或ONO-DI-004刺激的HCC的抑制作用及对HCC细胞周期、凋亡、PGE2、EP1和Bcl-2表达的影响，初步探讨EGCG抗HCC的作用靶点和机制。方法：HepG2细胞设置组别为：对照组、PGE2（0,4,40,400,4000,40000nM）组、EGCG （12.5,25,50,100μg/mL）组、PGE2（4,40,400,4000）+EGCG（100μg/mL）组、ONO-DI-004（4,40,400,4000nM）组、ONO-DI-004+EGCG（100μg/mL）组、ONO-8711（210nM,1,5,10μM）组。MTT法检测HepG2的增殖；细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测HepG2的移行；Western blot assay和免疫荧光实验检测HepG2中EP1、Gq和Bcl-2蛋白的表达；酶联免疫分析法检测HCC患者血清PGE2及HepG2产生PGE2和VEGF的水平；流式细胞技术检测HepG2细胞周期和凋亡。结果：1. HCC患者的血清中PGE2的水平呈高表达与正常志愿者血清中的PGE2水平比较，HCC患者的血浆中PGE2的水平呈高表达。2.降低PGE2和VEGF水平、下调EP1和Bcl-2的表达是EGCG抑制HCC的重要作用与对照组相比，EGCG （12.5,25,50,100μg/mL）显著降低HepG2中PGE2和VEGF水平。EP1在肝癌细胞株MHCC-97L和HepG2中的表达明显高于在人肝细胞株L02中的表达。EGCG （100μg/ml）能显著抑制EP1受体以及ONO-DI-004诱导的Bcl-2的表达（**P<0.01）。3. EGCG对外源性PGE2或ONO-DI-004刺激HCC增殖和移行具有显著的抑制作用观察EGCG （12.5,25,50,100μg/mL）作用于HepG2后对细胞的增殖作用，100μg/mL EGCG对HepG2作用24h后可显著抑制HepG2的生长（**P<0.01）,细胞的平均抑制率为41%。24h的药物浓度与抑制率具有相关性（r=0.8，P=0.02）。EGCG对HepG2具有显著抑制作用。细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察PGE2（4μM）和ONO-DI-004（400nM）刺激后，HepG2移行较对照组明显增加，EGCG和ONO-8711均能显著抑制HepG2移行，且给予EGCG （100μg/mL）后可显著降低PGE2和ONO-DI-004刺激的HepG2的移行（**P<0.01）。4. EGCG能促进HepG2凋亡流式细胞术检测细胞凋亡率，HepG2经ONO-DI-004（400nM）、PGE2（4μM）、EGCG （100μg/mL）、EGCG （100μg/mL）+ONO-DI-004（400nM）以及EGCG （100μg/mL）+PGE2（4μM）作用24h，对照组的细胞凋亡率为（2.36±2.51）%, EGCG （100μg/mL）处理组的凋亡率为（16.8±1.73）%，EGCG （100μg/mL）处理组与对照组的细胞凋亡率相比差异性显著（**P<0.01）。ONO-DI-004（400nM）处理组的凋亡率为（0.6±1.86）%, EGCG （100μg/mL）+ONO-DI-004（400nM）处理组的凋亡率为（12.25±2.64）%，两组间的差异具有显著性（**P<0.01）。EGCG （100μg/mL）可显著的诱导HepG2细胞的凋亡，对PGE2、ONO-DI-004刺激的HepG2细胞也有明显的促凋亡作用。结论1. HCC患者血清中PGE2表达异常升高，提示PGE2在HCC患者中发挥重要作用；2. HCC细胞株中EP1表达较正常肝细胞异常升高，PGE2可能通过EP1发挥促HCC作用；3. EGCG呈浓度依赖性抑制由PGE2和ONO-DI-004刺激引起的HepG2的增殖和转移，抑制HCC异常增殖、移行、细胞周期，诱导凋亡是EGCG的重要作用；4. EGCG抑制HepG2产生VEGF和PGE2，降低EP1及ONO-DI-004刺激的Bcl-2的表达，但对Gq蛋白的表达没有影响，降低PGE2和VEGF水平、下调EP1和Bcl-2的表达是EGCG抑制HCC增殖和移行、诱导凋亡的重要机制之一。