免疫磁性细胞分选是基于抗体对抗原的特异性识别,将磁性微粒直接或间接偶联在抗体上,进而与细胞结合,借助高强度或梯度磁场达到特定细胞分离的目的。近年来,从手动到自动,从实验室到临床应用,该项技术受到了广泛的关注,德国Miltenyi、美国Invitrogen (Dynal Beads)等推出了一系列商品化试剂盒产品,但我国磁式细胞分选技术和产品还较为落后。因此,以自主研发的磁性微粒为载体,建立细胞分选体系,具有重要意义。基于直接和间接磁性细胞分选的原理,将xMagTM异硫氰酸根末端磁粒、GoldMag(?)AS微米金磁微粒、GoldMag(?)S纳米金磁微粒、xMagTMproteinG磁性微粒以及xMagTM Streptavidin磁性微粒分别偶联单克隆抗体,通过优化磁粒与抗体的比例,从人外周血中分选不同类型淋巴细胞亚群,以流式细胞仪评价和比较磁粒对特定细胞的分选效果,初步筛选基于间接法的链霉亲和素磁性微粒可作为细胞分选的理想载体。将链霉亲和素磁性微粒与生物素标记抗体偶联,对免疫磁性细胞分选系统进一步优化,通过磁粒载量、温度、时间的优化,建立了链霉亲和素磁性微粒的CD4细胞的分选方法。实验结果表明：基于直接和间接原理的五种磁性微粒均能从人外周血中分选出靶细胞,基于分选效果、成本、稳定性等方面考虑,最终确定链霉亲和素磁性微粒作为该分选体系的最适材料,进行更深入的研究。优化后的体系为,用1/2链霉亲和素载量的磁性微粒进行细胞分选最为合理。分选人外周血CD4细胞,当总细胞数为1×106时,生物素化抗体用量为0.4μg,磁粒用量16μg,分选溶液经过预冷后4℃孵育,孵育时间为15 min,其分选效率及纯度都能达到90%以上,细胞活性不受影响,分选结果稳定,且应用该体系能够成功从外周血中分选CD4、CD8、CD16、CD19等不同的淋巴细胞亚群。该系统与美天旎试剂盒进行比较,可同样实现从外周血中高效分选高纯度CD4细胞的目的。本课题的研究为体系拓展用于更多淋巴细胞亚群的分选奠定了基础。