分析化学中的衍生化技术是将样品中的待测组分制成衍生物,使其更适合于特定的分析方法。衍生化在色谱分析中的作用归纳起来主要有以下几点:(1)提高待测物的检测灵敏度;(2)改变化合物的色谱性能,改善分离效果;(3)适合进一步做化合物的鉴定;(4)扩大色谱分析的应用。本文进行了羧酸及胺类化合物衍生化试剂的开发利用研究。主要研究内容如下:1.衍生化试剂APy-PPZ((S)-1-[3-(4-甲基哌嗪)-4,6-二硝基-苯基]-3-氨基吡咯烷)的应用研究。以酮洛芬(KET)为研究对象,对其进行了分离分析。本实验采用柱前衍生化-高效液相色谱法对KET进行对映异构体的分离以及对药物中酮洛芬的含量进行检测。最后成功地检测到酮洛芬药物中的含量。接下来,本文又建立了稳定同位素标记法,利用LC-ESI-MS对唾液中酮洛芬的含量进行分析。如此在酸性的流动相条件下,酮洛芬先通过HPLC进行分离,然后在正离子模式下进行ESI-MS检测,可以获得高的离子化效率及相对应的高检测灵敏度。利用此法,我们成功地检测到了健康人体服用药物3 h后,唾液中酮洛芬的含量,其中S-酮洛芬的含量是2.26 ng/mL,R-酮洛芬的含量是1.1 ng/mL。2.稳定同位素标记试剂1-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-4,4-二甲基哌嗪鎓碘化物(MPPZ)的合成近年来基于LC-MS方法得到快速发展,已成为蛋白质组定量的主流技术。鉴于一级质谱化学标记方法难以实现同时超过四重标记的问题,我们设计了五重标记试剂。本文合成了其中的稳定同位素标记试剂MPPZ。合成方法:1-(2,4-二硝基-5-氟苯基)-4-甲基哌嗪直接与碘甲烷在60 ℃下反应30 min即可得到MPPZ。