【摘 要】
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[研究目的]急性痛风性关节炎是一种自限性炎症疾病,其发生发展过程与Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor protein,NLRP3）炎症小体密切相关。NLRP3炎症小体是胞浆内模式识别受体（Pattern Recognition Receptors,PRRs）参与组装的多蛋白复合物,是天然免疫系统的重要组成部分。龙胆苦苷（Gentiopicroside,GPS）具有抗炎、保肝、抗
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[研究目的]急性痛风性关节炎是一种自限性炎症疾病,其发生发展过程与Nod样受体蛋白3（Nod-like receptor protein,NLRP3）炎症小体密切相关。NLRP3炎症小体是胞浆内模式识别受体（Pattern Recognition Receptors,PRRs）参与组装的多蛋白复合物,是天然免疫系统的重要组成部分。龙胆苦苷（Gentiopicroside,GPS）具有抗炎、保肝、抗癌等作用,被广泛运用于基础与临床研究中。本课题旨在基于NLRP3炎症小体探讨GPS对急性痛风性关节炎的具体作用机制,为GPS抗急性痛风性关节炎疾病提供新的治疗靶点。[研究方法]本课题体内实验通过在C57BL/6小鼠足背处注射单钠尿酸盐（Monosodium urate,MSU）建立急性痛风性关节炎模型,然后予以不同剂量GPS治疗。在不同时间点检测小鼠机械痛、热痛阈值,以及足背肿胀程度。H＆E染色和髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）活性分析检测足背处炎症和中性粒细胞浸润情况。通过酶联免疫吸附试验测定小鼠足背处及血清中IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α等促炎因子的释放水平。qRT-PCR和蛋白印迹法分别检测NLRP3炎症小体组分NLRP3、ASC、Caspase-1的mRNA和蛋白表达水平。此外,本课题体外实验通过LPS+MSU诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7建立NLRP3炎症小体活化模型,并通过qRT-PCR和Western blot分别检测细胞内NLRP3炎症小体各组分的mRNA和蛋白表达水平。[研究结果]我们发现GPS具有NLRP3炎症小体活化负调节作用。体内实验结果提示,由MSU诱导的小鼠急性痛风性关节炎模型中,NLRP3炎症小体各组分的mRNA和蛋白表达水平明显增加,但这一趋势被GPS减弱;GPS还可显著缓解由MSU导致的机械痛、热痛以及肿胀程度;足背处的炎症和中性粒细胞浸润情况经GPS治疗后也明显缓解;此外,GPS也可显著降低足背以及血清中IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α等促炎因子的释放水平。体外实验结果提示,和体内实验相一致,GPS能够从mRNA和蛋白多水平调控NLRP3炎症小体的活化情况。[结论]1.GPS能够有效缓解由MSU诱导的急性痛风性关节炎小鼠模型的机械痛、热痛和肿胀程度。2.GPS具有NLRP3炎症小体活化的负调节作用。3.GPS能够显著缓解由MSU诱导的急性痛风性关节炎小鼠模型的IL-1β、IL-6、IL-18和TNF-α等促炎因子释放以及中性粒细胞浸润。
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