重组人骨形态发生蛋白-2对骨髓抑制造血损伤的修复研究

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骨形态发生蛋白-2(BMP-2)属于转化生长因子(TGF-β)超家族成员,是目前唯一具备单独骨诱导能力的局部生长因子。近年来研究表明,BMP还与动物胚胎时期的造血发生关系密切,在胚胎发育期对中胚层诱导分化造血系统发生、发育起着重要作用。已有文献报道BMP对成年动物造血损伤具有修复作用。本文以重组入骨形态发生蛋白-2(recombinanthumanbonemorphogeneticprotein-2,rhBMP-2)为研究对象,研究了rhBMP-2对三种骨髓损伤模型所导致的骨髓抑制的修复作用。  1.以环磷酰胺为化疗药物建立小鼠急性化疗损伤模型,以rhBMP-2为治疗药物连续6天腹腔注射。结果显示:给予rhBMP-2治疗后小鼠的外周血白细胞数回升速度明显快于对照组;骨髓有核细胞数显著提高;治疗组骨髓细胞中CD34+和CD45+细胞的含量和相关的基因表达均增加;脾系数值显示rhBMP-2有助于恢复化疗后损伤脾脏的功能;集落培养表明rhBMP-2治疗组的集落数以及细胞形态都优于化疗组;细胞周期检测显示骨rhBMP-2对小鼠骨髓细胞的G1期有保护作用,从而阻止骨髓细胞的凋亡,保护骨髓细胞免受环磷酰胺的破坏。研究表明,rhBMP-2能够促进化疗损伤小鼠造血功能的恢复,并且促进效果与其剂量相关。  2.采用60Coγ射线辐照建立小鼠急性辐射损伤模型,以rhBMP-2为治疗药物连续2周腹腔注射。结果显示:急性辐射损伤期内rhBMP-2治疗组的外周血白细胞数并没有迅速回升,但度过急性损伤期后,rhBMP-2治疗组外周血白细胞上升明显快于辐射对照组;rhBMP-2治疗组对辐射损伤后骨髓单核细胞数及脾系数均有促进作用,并且能提高辐射损伤小鼠骨髓细胞中CD34+和CD45+细胞含量及相关的基因表达;体外集落培养显示骨髓细胞集落个数和细胞形态均明显好于辐射对照组。研究表明,rhBMP-2对于急性辐射损伤小鼠造血功能的修复具有促进作用。  3.采用五氟尿嘧啶联合白消安用药建立小鼠再生障碍性贫血模型,以rhBMP-2为治疗药物连续1周腹腔注射。结果显示:rhBMP-2治疗组在外周血白细胞、存活率、骨髓单核细胞数、脾系数、CFU-GM集落数、骨髓单核细胞中CD34+细胞含量等与造血表征相关指标中虽然都还低于正常值,但均明显高于再障对照组,脾脏组织学检测也显示rhBMP-2治疗组的脾脏功能恢复好于再障组。研究表明,rhBMP-2对于小鼠再生障碍性贫血导致的骨髓抑制具有恢复作用。  上述研究初步验证了将rhBMP-2用于骨髓抑制引起的机体造血损伤修复治疗的可能性,为探究rhBMP-2的造血机理及新药研发提供实验依据。
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