苹果砧木耐盐突变体的筛选及其鉴定

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:houguangyun1981
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苹果是重要的果树树种之一,主要靠嫁接繁殖,其耐盐性主要取决于砧木。因此,选择利用具有较高耐盐能力的砧木是提高苹果耐盐性的关键。利用组织培养与诱变技术相结合选育抗性突变体,可提高耐盐砧木育种效率,获得优良的新种质。但是经诱变和耐盐性反复筛选而获得的突变体,不排除部分个体是由环境胁迫而产生的适应性改变,而并非稳定的遗传变异。因此,突变体的鉴定是诱变育种的关键环节之一。 本试验以苹果砧木78-48和EH-78-48为材料,以NaCl作为耐盐选择剂,采用辐射诱变和组织培养技术相结合的方法,对苹果耐盐突变体的筛选及其鉴定进行了系统研究。主要研究结果如下: 1.建立了78-48和EH-78-48的高效叶片再生体系,再生培养基为MS+BA2.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1或MS+TDZ1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,暗培养时间20d最佳。 2.60Co-Υ辐射诱变明显抑制了78-48和EH-78-48植株的生长,诱变处理后两砧木畸形叶比例增加,叶片再生受到明显抑制。 3.选取诱变效应明显的植株叶片进行再生,采用NaCl 1.0%和1.2%作为选择压,对再生植株进行多代交替盐筛选,获得了耐盐性稳定的突变株系L和K。 4.对78-48及其耐盐突变体L1、L2、EH-78-48及其耐盐突变体K2的形态指标进行观察和测定,结果表明:耐盐突变体的存活率明显高于对照,受害率和受害指数低于对照,表现出较高的耐盐性。受害指数能够综合反映苹果砧木的盐害程度,能较准确地反映出盐胁迫对砧木的生长抑制作用,可作为描述苹果砧木耐盐性的形态学指标。 5.研究结果表明在盐胁迫条件下,苹果砧木细胞膜透性加大,MDA、O2-和Cl-含量升高,在处理期间耐盐突变体上述指标含量均显著低于对照,两者之间差异显著;SOD和POD酶活性、脯氨酸含量增加,在处理期间耐盐突变体明显高于对照,两者之间差异显著。Na-含量在盐胁迫条件下升高,K+含量降低,Na+/K+增大,但耐盐突变体的Na+/K+低于对照水平,说明突变体比对照更能忍受盐胁迫的伤害。 6.在盐胁迫条件下,苹果砧木耐盐突变体内多胺总量和精胺、亚精胺、腐胺含量都表现为先上升后下降的趋势,腐胺含量表现为先下降后上升的趋势,(Spd+Spm)/Put比值随着盐浓度的增加而升高。研究发现,不管是多胺总量、精胺、亚精胺、腐胺含量,还是(Spd+Spm)/Put比值,耐盐突变体都显著高于对照。 7.在盐胁迫条件下,苹果砧木体内IAA、GA和ZR含量和ZR/ABA比值逐渐降低;ABA含量增加,耐盐突变体ABA含量明显高于对照。 8.上述指标的相关分析结果表明,MDA含量、超氧阴离子含量、Cl-含量、
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