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胆固醇25羟化酶(CH25H)是一种干扰素(Interferon、IFN)刺激因子，且CH25H基因受干扰素调控。CH25H通过在胆固醇的第25位碳原子上加入第二个羟基，将胆固醇催化产生25-羟基胆固醇(25hydroxycholesterol，25HC)。研究报道CH25H在巨噬细胞中被IFN诱导，并且具有抑制病毒复制的能力。CH25H的催化产物25HC广泛抑制包膜病毒，例如鼠巨细胞病毒、水疱性口炎病毒、西尼罗病毒、人类免疫缺陷病毒、流感病毒、鼠疱疹病毒68和埃博拉病毒。25HC还抑制无包膜病毒如脊髓灰质炎病毒，人乳头瘤病毒-16，人轮状病毒和人鼻病毒。目前，关于猪CH25H是否影响伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的复制，还没有研究过。 为了研究CH25H对伪狂犬病毒复制的作用，本文首先进行了干扰素诱导试验和PRV感染细胞试验，用实时荧光定量PCR检测猪肺泡巨噬细胞(3D4/21)中CH25H基因mRNA的表达。其次以胸腺cDNA为模板，克隆CH25H基因并构建CH25H过表达载体和CH25H酶活性点突变载体。将质粒瞬时转染进细胞后感染PRV，检测过表达CH25H后对PRV复制的影响。同时设计了CH25H基因沉默试验，检测沉默CH25H基因后对PRV复制的影响。最后用25HC处理细胞后，检测25HC对病毒滴度变化的影响。以及25HC处理细胞后，检测25HC对PRV生活周期的影响。 试验结果表明，CH25H对PRV复制具有显著抑制作用。猪CH25H不但受干扰素调节，而且受PRV感染调节。在猪肺泡巨噬细胞3D4/21细胞中过表达CH25H明显抑制PRV感染。然而，下调CH25H的表达增强PRV复制。此外，在体外用25HC处理PRV感染的3D4/21细胞后，PRV的复制明显受到抑制，这表明CH25H通过其产物25HC抑制PR复制。进一步研究发现25HC抑制PRV与细胞的吸附和内化，进而抑制PRV复制。总之，研究表明PRV感染猪肺泡巨噬细胞的过程中，CH25H是PRV复制中的内在宿主限制因子。本文的研究结果，将为伪狂犬病的防治提供新的策略。