口蹄疫干粉制剂对动物鼻黏膜免疫效果研究

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黏膜免疫是动物机体防御传染病的第一道屏障,而鼻黏膜是许多病原微生物进入机体的必经之路,因此,鼻黏膜免疫对预防动物的传染病具有重要的意义。为了研究鼻黏膜的免疫效果,本研究首先对灭活口蹄疫病毒抗原进行浓缩纯化、冷冻干燥后,与相应的黏膜保护剂混合制成干粉,经标准筛筛选颗粒大小后,运用电子扫描显微镜、TG-DSC同步热分析仪等对粉末进行理化特性分析。结果表明:制备的干粉制剂颗粒大小易于雾化,喷雾过程中能附着于鼻黏膜表面,且在一定温度和湿度范围内稳定性良好,适于进行鼻黏膜部位的免疫。采用喷鼻途径对实验豚鼠和牛进行黏膜免疫,通过液相阻断和间接ELISA对黏膜分泌液及血清进行特异性抗体检测,来评价其黏膜特定部位免疫反应和全身性体液免疫应答水平;通过淋巴细胞增殖试验、流式细胞术检测CD4+和CD8+细胞含量等,来评价其全身性细胞免疫应答水平。结果表明:首次免疫后的实验豚鼠和牛,在第7天检测,均出现了不同程度的特异性IgA抗体水平,随后在血清中出现特异性IgA及IgG抗体水平。进行二次免疫后,抗体水平明显高于首次免疫,且抗体产生快,维持时间长。但是,与常规灭活疫苗相比,鼻黏膜免疫抗体水平较低,维持时间略短。淋巴细胞增殖试验及CD4+和CD8+细胞含量的流式检测也表明,鼻黏膜免疫不仅可以诱导黏膜特定部位的免疫应答,还可以诱导机体全身性的免疫应答。综上所述,口蹄疫干粉制剂的黏膜免疫,可以首先在鼻黏膜部位产生局部免疫应答,之后诱导全身性免疫应答。本研究结果,不仅为黏膜免疫的研究提供了有用的实验数据,并在很大程度上,为探索及研制口蹄疫黏膜疫苗奠定了实验基础。
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