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目的:探讨刚果红琼脂(the Congo Red Agar,CRA)和半定量黏附(microtiter plate assay,MtP)试验检测人工关节术后表皮葡萄球菌感染临床分离株生物膜形成能力;探讨人工关节术后表皮葡萄球菌感染分离株有无生物膜存在与耐药性之间关系;探讨人工关节术后表皮葡萄球菌感染分离株生物膜形成与相关icaA、icaD、Aap基因携带关系。方法:收集我院关节外科自2016年1月到2018年6月明确诊断的人工关节术后感染患者的标本,微生物培养所得细菌分离株,通过基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)明确鉴定的表皮葡萄球菌25株。分别采用刚果红琼脂(the Congo Red Agar,CRA)试验和半定量黏附(microtiter plate assay,MtP)试验两种方法,检测该25株表皮葡萄球菌生物膜存在情况;生物膜的CRA和MtP检测结果使用kappa一致性分析。使用VITEK2-compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪对微生物培养所得的25株表皮葡萄球菌进行药敏测定,临床分离表皮葡萄球菌耐药率采用卡方检验(x检验),当至少有一个理论数大于1小于5,使用Fisher’S确切概率法检验,结果以P<0.05为有统计学差异。通过多聚酶链式反应(PCR)方法检测表皮葡萄球菌分离株icaA、icaD、Aap基因携带情况,与CRA和MtP两种方法检测所得生物膜存在情况的结果,采用配对卡方检验进行分析。结果:25株表皮葡萄球菌分离株经CRA试验检测,其中形成生物膜9株,占36%,无生物膜形成16株,占64%;25株表皮葡萄球菌分离株经MtP试验检测,其中10株形成强生物膜,占40%,6株形成中生物膜,占24%,1株形成弱生物膜,占4%,无生物膜形成8株,占32%;将生物膜定量检测MtP试验中强生物膜存在定义为生物检测阳性,中、弱生物膜和无生物膜存在定义为生物膜检测阴性,行一致性分析,Kappa值=0.915(x>0.75),有较好的一致性。25株表皮葡萄球菌经药敏分析,其中耐甲氧西林的表皮葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus epidermidis,MRSE)达23株(92%),未产生对替加环素和万古霉素耐药;利福平、环丙沙星的耐药性在有、无生物膜形成菌株之间的差异有统计学意义(χ2=8.36/6.25,p分别为0.01和0.03)。通过PCR检测25株表皮葡萄球菌分离株,9株携带icaA基因、10株携带icaD基因、16株携带Aap基因;8株icaA、icaD、Aap基因共同表达,7株icaA、icaD不表达而Aap基因表达,2株icaA、icaD、Aap基因均不表达;结合25株表皮葡萄球菌是否存在生物膜情况,8株icaA、icaD、Aap基因共同表达的菌株经MtP和CRA检测均形成生物膜;7株仅Aap基因携带的菌株MtP检测只形成中等或弱的生物膜,CRA检测则无生物膜形成;2株caA、icaD、Aap基因均不表达菌株经MtP和CRA检测均为1株形成生物膜,1株无生物膜形成。对比ica基因携带阳性检测数据和生物膜存在结果,CRA试验检测生物膜的敏感性为72.7%,特异性为92.9%,而MtP检测生物膜的敏感性为81.8%,特异性为92.9%。结论:结晶紫半定量黏附(MTP)试验和刚果红琼脂(CRA)试验在检测生物膜存在能力具有较好一致性,但MTP在筛选生物膜阳性菌株上敏感性优于CRA;我院人工关节感染(Prosthetic joint infection,PJI)患者标本分离出的表皮葡萄球菌以MRSE为主,未对替加环素和万古霉素产生耐药;其中生物膜阳性菌株显示更多的利福平和环丙沙星耐药,抗感染治疗时需合理使用;共同表达icaA和icaD基因的表皮葡萄球菌具有强生物膜形成能力,Aap基因参与生物膜的形成,但单独表达时仅形成弱或中等程度生物膜。