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中药鸦胆子系苦木科鸦胆子属植物鸦胆子(Brucea javanica (L.) Merr.)的干燥成熟果实。鸦胆子油(Brucea javanica oil,BJO)为鸦胆子的药效成分,具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、抗胃溃疡、降脂降压、抑制血酸形成等药理作用。目前已上市的鸦胆子油剂型主要有鸦胆子油口服乳液、鸦胆子油乳注射液以及鸦胆子油软胶囊。鸦胆子油的药理药效明确,但现有剂型较少,难以满足临床用药需求,因此亟需开发出良好的鸦胆子油新剂型尤其是口服制剂。本实验考察了BJO-CDP灌胃后,BJO中指标成分鸦胆子苦醇在动物体内的药动学行为和组织分布,自制BJO-CDP与市售鸦胆子油乳剂生物等效性以及BJO-CDP口服给药的急性毒性,为开发鸦胆子油口服制剂并有效应用于临床提供基础实验依据。主要研究内容和结果如下：1建立生物样品中鸦胆子苦醇的HPLC测定方法色谱条件：色谱柱：Symmetry C18 (5 μm,4.6×250mm);流动相：甲醇-水,等度洗脱：甲醇：水=5：5；柱温：25℃；流速：0.8ml/min;检测波长：220 nm；进样量：40μl。以石油醚为萃取溶剂,鸦胆子苦醇在血浆、各组织匀浆液中的平均回收率大于80%,精密度RSD均小于5%,稳定性及在19.2～1536 ng/ml浓度范围内线性关系良好(R2>0.999)。2 BJO-CDP药动学及组织分布研究大鼠灌胃给药三组剂量BJO-CDP溶液(5g/kg、2g/kg、1g/kg),测定血液中鸦胆子苦醇浓度随时间变化关系,考察其在大鼠体内药动学特征。结果表明,鸦胆子苦醇在大鼠体内药物动力学特征符合二室模型,三组剂量平均血药峰浓度(Cmax)分别为：(593.869±53.381) ng/ml、(360.244±31.255) ng/ml、 (262.293±26.57) ng/ml;分别于给药后(3.6±0.548)、(3.4±0.548)h、(3.8±0.447)h达到峰值;吸收半衰期(t1/2ka)分别为：(1.151±0.693)h、(1.163±0.338)h、(1.5±0.288)h,分布半衰期(tt/2a)分别为：(2.649±1.001)h、(5.479±6.298)h、(2.605±1.152)h,消除半衰期(t1,2β)分别为：(41.057±31.116)h、(46.547±31.322)h、(56.373±28.939)h；浓度-时间曲线下面积(AUC0-t)分别为：(5267.556±248.833) ng/ml-h, (3214.986±74.704) ng/ml·h、(2212.106±186.25) ng/ml-h,总消除率(CL)分别为：(916.001±67.519)L/h/kg、(572.48±45.724)L/h/kg和(415.256±35.603) L/h/kg。小鼠灌胃给药最大体积最大浓度BJO-CDP溶液,测定心、肝、脾、肺、肾、肠、胃中鸦胆子苦醇浓度随时间变化关系,考察其在小鼠组织分布情况。结果表明,灌胃后鸦胆子苦醇在小鼠各组织中均有分布,其中肝、肺、肾、肠和胃中分布较多,心脏和脾脏中分布较少。3自制BJO-CDP与市售鸦胆子油乳剂生物等效性评价本试验对自制BJO-CDP及市售鸦胆子油乳剂进行了生物等效性评价,分别对主要药动学参数Cmax、Tmax、AUC采用方差分析、双单侧t检验及(1-2a)%置信区间的方法进行等效性统计学分析,结果显示两种制剂在大鼠体内不具有生物等效性。但由两制剂药动学参数Cmax 、Tmax、AAU及相对生物利用度可知,自制BJO-CDP生物利用度明显优于市售鸦胆子油乳剂。以曲线下面积AUC0-t计算的相对生物利用度F为168.609%；以AUC0-∞计算的相对生物利用度F为172.387%。4 BJO-CDP急性毒性试验小鼠灌胃给予最大体积(0.4 m1/10g)、最大浓度(83mg/ml)的BJO-CDP溶液,给药14天内,小鼠的摄食、饮水、外观体征及活动情况无异常改变,体重增长正常,未出现小鼠死亡例,实验结束后处死小鼠并解剖观察,未见脏器异常,切片观察,未见脏器有病理改变。实验结果表明：①本文所建立的鸦胆子苦醇HPLC测定方法专属性好、准确度高,稳定性好,可用于鸦胆子油的药动学和组织分布研究；②鸦胆子苦醇在大鼠体内的药动学符合二室模型,0.5 h后即可在血液中检测到鸦胆子苦醇,tmax为4h左右,之后血药浓度开始下降,24 h后高、中、低剂量组浓度分别为(53.8±8.91) ng/ml、 (34.3 ±11.75) ng/ml、 (25.9±10.90) ng/ml, Cmax和AUC都与剂量呈明显相关性。③生物等效性研究结果表明,自制BJO-CDP及市售鸦胆子油乳剂在大鼠体内不具有生物等效性。但由两制剂药动学参数Cmax、Tmax、AUC及相对生物利用度可知,自制BJO-CDP生物利用度明显优于市售鸦胆子油乳剂。④在急性毒性实验中,鸦胆子油用量相当于临床剂量的12.16倍,但仍未测出LD50,提示本品口服给药安全性高。