肾上腺素诱导成纤维细胞凋亡的机制研究

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目的:研究肾上腺素诱导体外培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的机制.方法:运用流式细胞术、基因组DNA电泳及Giemsa染色检测细胞凋亡.MTT法检测细胞存活率.通过测定细胞培养上清液LDH活性检测细胞毒性.Western-blot法检测成纤维细胞PKC磷酸化水平,RT-PCR及ELISA法检测bFGF、TGF-β1mRNA及其蛋白表达.结果:肾上腺素显著下调成纤维细胞存活率并上调其凋亡率.肾上腺素处理后正常及瘢痕皮肤成纤维细胞PKC磷酸化水平显著上调,bFGF mRNA及蛋白表达明显上调,TGF-β1 mRNA及蛋白表达显著下调;利其丁3×10-6μmol/L对成纤维细胞存活率、PKC磷酸化水平、bFGF和TGF-β1mRNA及蛋白表达无影响.给予肾上腺素及利其丁3×10-6μmol/L同时处理成纤维细胞后其细胞存活率、PKC磷酸化水平、bFGF、TGF-β 1mRNA及蛋白表达与肾上腺素单独作用时比较差异有显著性.肾上腺素、利其丁3×10-6μmol/L以及两者联合运用对细胞无毒性.结论:1肾上腺素通过与α受体结合,激活PKC从而抑制皮肤成纤维细胞增殖,促进皮肤成纤维细胞凋亡.2肾上腺素可能通过与α受体结合,激活PKC从而下调皮肤成纤维细胞TGF-β1表达,上调皮肤成纤维细胞bFGF表达.
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