目的:探讨组织化学染色法用以鉴定血吸虫体外培养细胞来源或种类的可能性;观察用血吸虫童虫活细胞诱导小鼠产生的保护性免疫效果.方法:采用日本血吸虫肝期童虫,经消化处理获取细胞作为形态学分析鉴定和保护性免疫研究.首先,取童虫细胞制作涂片和用成虫作组织切片,比较观察用PAS、硫堇、Grimelius嗜银、VG、TB和HE 6种组织化学染色法对细胞和组织的显色特征来鉴定细胞种类和来源.与此同时,采用日本血吸虫肝期童虫活细胞和虫体组织,在未加佐剂条件下分别接种昆明小鼠,每组10只,每隔两周接种1次,共4次,末次接种后第7d攻击感染血吸虫尾蚴30条/鼠,感染后第42d解剖小鼠,与对照组比较检测和分析虫体发育率和卵内毛蚴成熟率、鼠肝组织内虫卵肉芽肿大小、特异性抗体水平和IgG2a/IgG1亚类比值以及细胞抗原的免疫特性.结果:童虫细胞类别鉴定结果显示:根据6种组织化学方法染色特征,并通过细胞与虫体组织染色定位比较观察证实,除肥大细胞(TB染色)未在组织中发现外,其他细胞的染色结果均与成虫组织染色定位相一致.保护性免疫实验结果显示:细胞接种组和虫体接种组分别与PBS注射组比,其虫体发育率分别下降67.6％％和46.3％,其中细胞接种组比虫体接种组的虫体下降为39.66％;肝组织中虫卵数(LEPG)在细胞接种组和虫体接种组中分别减少95.4％和64.8％,细胞接种组比虫体接种组的LEPG下降为87.1％;肝虫卵肉芽肿大小和肝虫卵内毛蚴成熟率显著低于虫体接种组和对照组;特异性IgG2a/IgG1比值≥2,但总抗体水平低于虫体接种组;体外杀伤试验结果在各组间均无差异;感染鼠血清与细胞抗原反应未见明显识别条带,细胞抗原中仅能被细胞免疫血清识别的抗原为36kDa~38kDa组分.结论:1.证明用PAS、尼氏体、Grimelius、VG和TB五种染色法结合HE染色的形态学观察可以作为鉴定血吸虫体外培养细胞来源或类别的方法,且具有简单和快速的特点;2.用血吸虫童虫活细胞作保护性免疫实验的初步结果证明,在不加佐剂条件下虫体细胞可诱导小鼠产生显著的抗攻击感染免疫力,其机制可能为Th1介导的细胞免疫应答.