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马立克病毒(Marek’s disease virus,MDV)是一种与细胞相关的高度瘤性α疱疹病毒,为马立克氏病(Marek’s disease,MD)的病原体。MDV感染可导致一种家禽的淋巴细胞增生性疾病,并引起鸡的免疫抑制。虽然MD疫苗的使用可以有效防控本病的发生与传播,但当防控措施不到位或MD病毒的毒力发生改变等情况时,该病仍然对家禽产业造成严重的危害,带来巨大的经济损失。因此,对马立克氏病发生传播防控依然是家禽养殖业面临的挑战。MD防控中鸡群病毒感染监控是重要环节,对MDV感染监控标志物的筛选是关键问题之一。近年来,长度大于200个核苷酸的RNA长链非编码RNA(long non-coding RNA,Lnc RNA),参与了多种疾病发生的调控过程,Lnc RNA在疾病的发生发展过程中,通过调控疾病相关基因的表达水平等途径,在病毒感染疾病等的发生和发展过程中起着至关重要的作用,同时,作为一种新的疾病诊断标志物及防治的靶点,也受到广泛关注。本课题组前期通过RNA-seq预测分析获得了与肿瘤相关蛋白p53相关的5个差异表达lnc RNAs,分别是p53结合蛋白1Lnc RNA-1(TP53BP1Lnc RNA-1)、p53结合蛋白1Lnc RNA-3(TP53BP1Lnc RNA-3)、p53结合蛋白2Lnc RNA(TP53BP2Lnc RNA)、p53靶基因5Lnc RNA(TP53TG5Lnc RNA)、p53诱导基因3Lnc RNA(TP53I3Lnc RNA)。本研究拟对MDV感染不同时期鸡的脾脏组织和羽髓组织进行上述5个p53相关lnc RNAs水平的动态分析,旨在为鸡群MDV感染的早期监控潜在标志物的筛选及靶向药物的研发提供参考。本研究选取SPF雏鸡随机分为两组,同样条件下隔离饲养,试验组1日龄SPF雏鸡腹腔注射BJ-1MDV0.5m L/只(1000PFU/只),对照组雏鸡注射等量PBS(p H=7.4),分别在感染后1、7、14、21、35、42d采集动物的脾脏组织和羽髓组织。应用q PCR技术和Western Blot等分子生物学技术对鸡脾脏组织和羽髓组织的5个p53相关lnc RNAs的转录水平和p53的蛋白表达水平进行检测分析。研究结果表明:(1)与对照组相比,MDV感染不同时期鸡脾脏组织中4个lnc RNAs即TP53BP1Lnc RNA-1、TP53BP1Lnc RNA-3、TP53BP2Lnc RNA、TP53TG5Lnc RNA转录水平随着日龄的增加呈现先下降后上升的趋势,且组间差异显著(P﹤0.05);1个lnc RNA即TP53I3-Lnc RNA转录水平随着日龄的增加呈现逐渐下降趋势,且组间差异显著(P﹤0.05);(2)与对照组相比,MDV感染不同时期鸡羽髓组织中4个lnc RNAs即TP53BP1Lnc RNA-1、TP53BP1Lnc RNA-3、TP53BP2Lnc RNA、TP53TG5Lnc RNA转录水平随着日龄的增加呈现逐渐上升趋势,且组间差异显著(P﹤0.05);1个lnc RNA即TP53I3-Lnc RNA转录水平随着日龄的增加呈现逐渐下降趋势,且组间差异显著(P﹤0.05)。其中,TP53BP1Lnc RNA-1、TP53BP1Lnc RNA-3、TP53BP2Lnc RNA、TP53TG5Lnc RNA在脾脏和羽髓组织中的变化趋势相同,随着日龄的增加呈现先下降后上升的趋势,且组间差异显著(P﹤0.05);TP53I3-Lnc RNA在脾脏和羽髓中的变化趋势相同,随着日龄的增加呈现逐渐下降趋势,且组间差异显著(P﹤0.05)。脾脏组织和羽髓组织p53蛋白表达水平的检测分析,结果显示:(1)与对照组相比,MDV感染鸡脾脏组织中p53蛋白质表达水平随感染时间的增加呈现上升趋势,且组间差异极显著(P﹤0.01);(2)与对照组相比,MDV感染鸡羽髓组织中p53蛋白质表达水平随感染时间的增加呈现上升趋势,且组间差异极显著(P﹤0.01)。本研究结果表明在MDV感染后,随着感染时间的增加,鸡的p53相关lnc RNAs在鸡脾脏组织和羽髓组织中呈现出了上调或下调的一致性变化趋势,p53蛋白在脾脏组织和羽髓组织中呈现极显著升高趋势。研究结果表明p53相关lnc RNA在MD的发生发展过程中可能对肿瘤相关蛋白p53的表达及功能产生一定的影响,并因此促进了MD的发病进程,为MD检测标志物的筛选提供参考。脾脏组织和羽髓组织上述lnc RNA在MDV感染进程中呈现一致性的变化,因此,非伤害性样本鸡的羽髓组织可作为鸡群MDV感染监控的检测样本,从而减少对鸡只造成的伤害,为养禽业鸡群体MDV感染的监控的检测诊断提供便捷。