本文主要涉及S-腺苷-L-蛋氨酸（S-adenosyl-L-methionine，SAM-e或AdoMet，SAM）和谷胱甘肽（GSH）的生物合成、SAM的分离提纯及稳定盐产品的制备工艺与机理研究。 论文对SAM和GSH的性质、药理及应用、制备工艺的研究进展进行了详细的综述与分析，在此基础上确定了论文的研究内容。通过深入细致的研究工作，取得的主要研究成果包括： 1、利用啤酒厂废酵母，在外加L-蛋氨酸和葡萄糖的条件下，实现了酵母细胞同时生产SAM和GSH的目标，证明了在加入蛋氨酸生产SAM的同时得到了提高的GSH产量。确定了利用废酵母生产SAM的最适条件为：温度27～30℃内，pH6.0，K⁺浓度为0.12M。当L-蛋氨酸加入量在0.7g/l以上时，摇瓶水平SAM的产量可达25-40mg.g^-1，L-蛋氨酸转化率达30％以上，体积产量可达600～800mg/l。在15升发酵罐水平，当通气量为3.0vvm、搅拌速率500rpm，L-蛋氨酸浓度1.0g/l，葡萄糖浓度30g/l以及酵母密度（DCW）30g/l时，SAM的产量达45.8mg/g，体积产量1198mg/l，蛋氨酸转化率约44％，同时胞内还积累了17.0mg/g的GSH。实验结果表明。我国有丰富的啤酒厂废酵母资源，利用啤酒厂废酵母生产SAM及GSH可以实现废酵母的综合利用、提高废酵母的附加价值，具有良好的工业化应用前景。 2、通过对酵母菌株的产SAM能力的筛选，发现酿酒酵母ZJUS1在补加L-蛋氨酸的条件下具有较高的SAM生产能力；确定了利用酿酒酵母ZJUS1在间歇培养约一天后直接向发酵液内补加1.0g/l蛋氨酸、30g/l葡萄糖的培养—转化两步法同时生产SAM和GSH的策略；在摇瓶水平对转化阶段的操作条件进行了考察，确定了最适补加葡萄糖浓度为30g/l，最适补加L-蛋氨酸浓度为1.0g/l；对SAM和GSH合成的最适初始转化pH分别为5.0和6.0。15升发酵罐内培养—转化两步法实验数据表明，较高的溶氧水平及初始酵母密度有利于促进SAM产量的提高，而GSH在酵母胞内的积累表现在SAM合成的后期；在高溶氧水平（DO＞40％），L-蛋氨酸的转化率高达37.4％，SAM体积产量达1003.9mg/l，干细胞产率为82.2mg/g，GSH的最高产量达0.92％（g/g），体 浙江大学博士学位论文 摘要 积产量达 140 mg／l。实验表明，培养酵母的 SAM合成能力大大高于啤酒厂废 酵母，但GSH积累水平大大低于啤酒厂废酵母。3、对SAM和 GSH的合成机理、能量代谢在SAM和 GSH合成中的重要作用、 溶氧对酵母细胞好氧呼吸和厌氧代谢的影响及其对SAM和GSH积累的影响 机理进行了分析和讨论，在此基础上，建立了代谢溢流模型描述酵母细胞生 长、底物消耗和产品形成的动力学，模型较好地描述了间歇培养一转化过程。 上述工作为进一步改进酵母细胞同时积累 SAM和 GSH的工艺提供了理论基 础，为利用代谢工程改造酵母细胞指出了方向。4、研究开发了利用苦味酸代替文献中采用的苦酮酸沉淀分离SAM，并结合溶剂 革取、溶解以及结晶方法的SAM分离和提纯制备工艺。结果表明，苦味酸是 一种选择性较好的沉淀剂，沉淀步骤得率在 90％以上，制备 SAM的硫酸盐的 总得率在60％以上，而硫酸对甲苯磺酸双盐的得率在50％以上，产物的纯度 达到了 95 ％以上，已经达到了国外同类产品的质量指标。5、通过筛选，获得了对SAM有较好选择性离子交换能力、较易洗脱和再生的争 光 D 113弱酸型阳高于树脂，研究了温度。pH等对 SAM离于交换的影响，根 据SAM在弱酸阳离子树脂Dll3上的等温交换平衡行为表现出较强的可逆性， 考虑到交换基（－COOH）的弱电解质性质以及结合Donan膜平衡理论，建立 了考虑pH影响的可逆离子交换平衡模型，该模型可以较好地描述SAM平衡 浓度、pH对离子交换平衡的影响：通过对动态离子交换过程的研究，得到了 SAM在 D 113树脂内的有效扩散系数的数量级为 1．OE习 cm勺s－1．OE8 cm一s。6、研究开发了利用Dll3离子交换树脂结合聚苯乙烯类SD300脱色树脂的SAM 分离提纯工艺，该工艺可以得到98％纯度的SAM，Dll3弱酸型阳离子树脂 柱分离SAM的得率在90％以上，处理量为41．8 g SAMmter树脂；SD30O脱 色树脂柱的SAM得率达到了95％以上。 总之，通过本论文的研究工作，基本确定了利用啤酒厂废酵母和培养酵母生产 SAM和 GSH的生物转化工艺；提出了以苦味酸沉淀和离子交换分离为核心的两条分离提纯SAM的工艺路线；建立了生物转化和离子交换平衡的物理模型；为在我国实现SAM的工业化生产打下了良好的基础。