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骨保护素基因修饰的大鼠骨髓基质细胞系的培养、表达与鉴定 目的:培养经OPG基因修饰的大鼠骨髓基质细胞系并检测其表达能力,鉴定表达产物,为基因工程技术治疗牙周病提供物质基础。 方法:本研究采用密度梯度离心法从成年SD大鼠骨髓中分离获得骨髓基质细胞,利用已构建的pSecTag-opg真核分泌表达穿梭载体,用脂质体法将目的基因转染至大鼠骨髓基质细胞,并应用免疫组织化学和western blot方法证实转染的细胞表达骨保护素。 结果:分离培养出大鼠骨髓基质细胞,经脂质体法转染目的基因并建立了稳定转染的细胞系。经免疫组织化学和western blot方法检测,在转染OPG基因的大鼠骨髓基质细胞中有骨保护素表达。 结论:本实验成功培养出分泌表达OPG的大鼠骨髓基质细胞系。