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目的:研究磁感应加温治疗联合免疫佐剂对Walker-256肿瘤疗效的影响,探讨磁感应热疗联合免疫佐剂影响肿瘤疗效的机制。
方法:将36只大鼠随机分为六组,每组6只:第1组:肿瘤动物模型空白对照组,第Ⅱ组:铁磁热疗组(42~46℃,加热30min),第Ⅲ组:铁磁热疗组(50~55℃,加热6min),第Ⅳ组:铁磁热疗+免疫佐剂组(42~46℃,加热30min),,第Ⅴ组:铁磁热疗+免疫佐剂组(50~55℃,加热6min),,第Ⅵ组单纯免疫佐剂组。加热2周后将大鼠处死。1.取其肿瘤及其周围组织,做H.E染色,观察其病理学变化。2.采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(S-P)法,测定36例大鼠加热后VEGF的表达和免疫细胞数量的变化,观察各组大鼠免疫学指标的变化,并探讨磁感应热疗联合免疫佐剂对肿瘤的抑制作用。
结果:
1.大鼠热疗前后肿瘤体积的变化:第Ⅰ组和第Ⅵ组肿瘤平均体积增长的较为明显:但死亡率较高;第Ⅱ组:肿瘤体积增长缓慢。其中第Ⅴ组大鼠肿瘤有3只完全消退的情况,这组大鼠由于在温度升高50℃左右,同时加入了完全弗式佐剂,肿瘤体积有明显的下降趋势,差异有显著性。
2.肿瘤组织与癌旁组织的病理变化:加热后,接近表面的肿瘤组织大片凝固性坏死,表现为呈嗜酸性增强,细胞结构消失,核固缩、核碎裂现象明显增多,大量细胞碎片形成。
3.免疫组化:CD4+和C08+T淋巴细胞正常对照组仅有极少散在的表达,而铁磁热疗组阳性细胞数明显多于对照组(P<0.05)。铁磁热疗+免疫佐剂组CD4+和CD8+T淋巴细胞明显增多,说明免疫反应增强,差异有显著性(其中P<0.05)。
4.RT-PCR检测VEGFmRNA的表达:结果显示,热疗后VEGF均有表达,第Ⅴ组VEGF的表达高于其它各组,差异有统计学意义。
结论:研究发现50~55口磁感应加温联合免疫佐剂持续热疗6min时,是治疗Walker-256肿瘤细胞比较有效的热疗方法。影响肿瘤疗效的机制是通过CD4+/CD8+T细胞的升高和抑制VEGF的表达来实现的。