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目的:既往研究显示,BDNF（Brain derived neurotrophic factor,脑源性神经营养因子）与其高亲和力受体TrkB（Tropomyosin related kinase B,酪氨酸激酶B）在疼痛的形成机制中发挥重要作用,调控BDNF与TrkB能够缓解疼痛的发生发展。本研究运用CFA（Complete Freund’s Adjuvant,完全弗氏佐剂）诱导炎性痛小鼠模型,在建立稳定可靠的针刺双侧足三里穴对CFA小鼠镇痛有效的实验平台基础上,围绕针刺通过调节BDNF-TrkB以镇痛这一核心问题,探讨与之相关的可能途径与机制,为针刺镇痛研究提供新的证据。方法:1.在研究内容一中,采用小鼠右侧足底皮下注射50μL CFA诱导炎性痛并针刺双侧足三里穴,以足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值评价针刺CFA小鼠的镇痛效应,以旷场试验评价针刺对CFA小鼠的自发运动及痛情绪的影响,采用Western blot法检测脊髓COX1（Cyclo-oxygen-ase 1,环氧化酶1）的表达,采用ELISA法检测脊髓PGE2（Prostaglandin E2,前列腺素E2）的表达。2.在研究内容二中,采用COX1基因敲除小鼠,并在右侧足底皮下注射50μL CFA诱导炎性痛,观察足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值的变化情况,采用ELISA法检测脊髓PGE2的表达,采用Western blot法检测脊髓BDNF、TrkB的表达。3.在研究内容三中,基于针刺镇痛有效的前提下,采用Western blot法检测脊髓EP2（Prostaglandin receptor 2,前列腺素受体2）、EP4（Prostaglandin receptor 4,前列腺素受体4）、BDNF、TrkB的表达,采用免疫荧光共染技术观察EP2与神经元、BDNF与神经元、TrkB与小胶质细胞的共定位情况。4.在研究内容四中,对BDNF-TrkB下游的PI3K-Akt信号通路以及NF-κB信号通路进行探索,在肯定针刺镇痛有效的前提下,采用Western blot法检测脊髓p-PI3K p85与PI3K p85、p-Akt与Akt、p-IκBα与IκBα、p-NF-κB p65与NF-κB p65的表达。结果:1.研究内容一的结果显示,造模后24h,与盐水组相比,模型组和针刺组小鼠的足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值明显下降（P<0.01）,并且持续至第7天（P<0.01）。与模型组相比,针刺组小鼠的足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值从D1针刺后开始增高（P<0.01）,并持续至第7天（P<0.01）。旷场试验结果显示,造模后24h,与盐水组相比,模型组和针刺组小鼠的运动总路程、平均速度、中央区活动路程、中央区活动时间降低（模型组均P<0.01,针刺组均P<0.05）。在D7针刺后,与盐水组相比,模型组小鼠的运动总路程、平均速度、中央区活动路程、中央区活动时间仍降低（P<0.05或P<0.01）;针刺组小鼠四项指标降低,但未见统计学差异（P>0.05）。与模型组相比,针刺组小鼠的运动总路程、平均速度、中央区活动路程、中央区活动时间均增高（P<0.05）。对第7天的脊髓进行检测,与盐水组相比,模型组小鼠脊髓的COX1（P<0.01）、PGE2（P<0.05）增高;针刺组COX1、PGE2变化无统计学差异（P>0.05）。与模型组相比,针刺组小鼠脊髓COX1下降有统计学差异（P<0.05）,PGE2下降无统计学差异（P>0.05）。2.研究内容二的结果显示,注射CFA后,与盐水组相比,WT模型组和COX1-/-模型组小鼠的足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值均下降（P<0.01）,并持续至D3、D5、D7（P<0.01）。与WT模型组相比,COX1-/-模型组小鼠的足底热辐射痛阈值、足底机械痛阈值在D5和D7时回升（P<0.01）。对造模后第7天的脊髓进行检测,与盐水组相比,WT模型组PGE2升高无统计学差异（P>0.05）,BDNF（P<0.05）、TrkB（P<0.01）升高;COX1-/-模型组PGE2降低,BDNF、TrkB无明显变化,均无统计学差异（P>0.05）。与WT模型组相比,COX1-/-模型组PGE2（P<0.05）、BDNF（P<0.05）、TrkB（P<0.01）降低。3.研究内容三的结果显示,对针刺干预7天后的脊髓进行检测,盐水组、模型组、针刺组小鼠脊髓的EP4表达未见明显变化（P>0.05）。与盐水组相比,模型组小鼠脊髓的EP2（P<0.01）、BDNF（P<0.01）、TrkB（P<0.01）升高;针刺组EP2、BDNF、TrkB变化无统计学差异（P>0.05）。与模型组相比,针刺组小鼠脊髓EP2（P<0.01）、BDNF（P<0.01）、TrkB（P<0.05）降低。免疫荧光检测结果显示EP2与神经元、BDNF与神经元共定位,TrkB与小胶质细胞未见共定位。4.研究内容四的结果显示,对针刺干预7天后的脊髓进行检测,盐水组、模型组、针刺组三组小鼠脊髓p-PI3K p85/PI3K p85未见明显变化（P>0.05）。与盐水组相比,模型组小鼠脊髓p-Akt/Akt（P<0.01）、p-IκBα/IκBα（P<0.05）、p-NF-κB p65/NF-κB p65（P<0.01）升高,针刺组p-NF-κB p65/NF-κB p65升高有差异（P<0.01）,p-Akt/Akt、p-IκBα/IκBα变化无差异（P>0.05）。与模型组相比,针刺组小鼠脊髓p-Akt/Akt（P<0.05）、p-IκBα/IκBα（P<0.05）、p-NF-κB p65/NF-κB p65（P<0.05）降低。结论:1.针刺双侧足三里穴对炎性痛小鼠具有镇痛效应,并能够改善运动功能,缓解疼痛相关负性情绪。2.针刺可能通过降低脊髓组织COX1、神经元上EP2及BDNF,并且抑制TrkB及下游PI3K-Akt、NF-κB信号通路的激活发挥镇痛作用,但尚不能证明BDNF-TrkB的作用细胞为小胶质细胞。