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研究目的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)一直是心血管疾病中研究的热点,由于临床病理组织难以获取,建立动物病理模型并以此模型作为实验对象成为最主要的实验方法。肺动脉高压的重要病理基础是肺血管的重构,而肺血管重构其前提是细胞的损伤、修复、过度增殖,尽管国内外学者对此进行了大量的研究,但细胞增殖级联变化的确切机制至今仍未完全阐明。已有研究表明细胞内的应激反应及氧化-抗氧化系统失衡即为重要发病机制之一。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是一组特异性金属蛋白,大量研究证实,其对缺血再灌注损伤、机体炎症反应等反应具有保护作用。本次实验通过向建立的肺动脉高压大鼠模型尾静脉注射外源性超氧化物歧化酶(Exterior SOD),探讨SOD对肺动脉血管重构的影响,为临床药物治疗肺动脉高压提供更多理论基础。材料与方法45只SD雄性大鼠随机分为3组,正常对照组(Control,n=15),左颈总动脉-颈外静脉套管连接组(手术组,n=15),左颈总动脉-颈外静脉套管连接组+SOD组(手术+SOD组,n=15)。后在同条件饲养环境饲养40d后,应用传统的右心导管法分别测定本实验3组大鼠肺动脉平均压力(meanpulmonary arterial pressure,mPAP);留取血液进行血液总活性氧族(Reactiveoxygen species,ROS)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)、一氧化碳(Carbonmonoxide,CO)、及丙二醛(Malonaldehyde,MAD)的检测;处死大鼠切取相关所需实验组织及标本,称重,计算心脏右心室/体重(RV/BW)比值,并计算右心室肥大指数(Right ventricular hypertrophy index,RVHI);切取肺组织,常规石蜡包埋技术处理后切片并HE染色,光学显微镜观测肺血管结构的变化,应用图像分析仪对血管壁变化、肺动脉肌化程度作量化计算;应用DNA片段末端标记的TUNEL检测法检测大鼠肺动脉细胞凋亡情况;分离肺动脉血管,匀浆;部分匀浆提取锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、铜锌氧化物歧化酶(Cu-ZuSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)mRNA,应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测相关基因表达情况。结果(1)建模过程中,无大鼠死亡,术后大鼠恢复较快,一般情况观察未见有明显差异。(2)与正常对照组比较,颈总动脉-颈外静脉套管分流组、颈总动脉-颈外静脉套管分流组+SOD组,术后40d时,测定的血清MOD值、mPAP值、RV/BW比值和RVHI指数均明显高于对照组,而测定的血浆NO、CO明显低于对照组,其中单纯手术组组大鼠上述指标与手术+SOD组,两组数据也存在较大差异,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与正常对照组比较,后2组肺动脉高压模型大鼠血管管壁厚度占外径的百分比(WT%)、管壁面积占血管截面总面积百分比(WA%)均高于对照组(P<0.05),其中,手术+SOD组明显高于手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与对照组比较,分流组大鼠肺动脉组织线粒体膜肿胀,线粒体活力下降;肺动脉血管组织中锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、铜锌氧化物歧化酶(Cu-ZuSOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)表达量,手术+SOD组明显高于对照组及手术组,而手术组数据明显低于正常对照组,且手术+SOD组大鼠线粒体膜肿胀度较手术组轻,活力有不同程度恢复,且细胞凋亡率明显减小,差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)劲总动脉-颈外静脉套管分流法建立肺动脉高压模型方法,大鼠出现了右心室肥厚及肺血管重构现象,表明颈总动脉-颈外静脉套管分流法能作为肺动脉高压研究的有效模型。(2)外源性超氧化物歧化酶(SOD)通过抗氧化作用,并激活机体自身合成抗氧化蛋白等的MnSOD,CuZnSOD,GPx抗氧化酶基因表达而增强自身抗氧化,减轻应激反应,避免细胞过多损伤、增生,延缓肺动脉高压的发展进程,其机制可能在于修复氧化应激引起的生物膜及生物大分子损伤有关。