假丝酵母脂肪酶是一种具有重要工业应用前景的微生物脂肪酶。本文对一株高产脂肪酶的菌株—假丝酵母99-125发酵生产脂肪酶的工艺条件进行了研究。通过对培养基中氮源、碳源等重要因素的优化,重新筛选了更优的培养基成分豆粕,在合适的摇床培养条件：温度26℃,起始pH不调整,转速220rpm下,发酵水平达到5000IU/ml以上。初步研究了豆粕水解液作为发酵培养基中的氮源对产酶的影响,结果发现豆粕水解液有取代豆粕发酵的趋势,最终的发酵液更有利于后续脂肪酶分离提取等处理。另外研究了脂肪酶发酵过程中油脂对产酶的影响,分析了豆油代谢产物以及它们之间的变化趋势,发现油酸作为代谢产物可以诱导脂肪酶的产生,对提高脂肪酶的活力有重要意义。分别在实验室的30L以及工厂的100L和1m3发酵罐上对脂肪酶发酵工艺进行了放大实验,获得了成功,通过豆油控制体系的pH值,使发酵产酶水平稳定在8000IU/ml以上。在脂肪酶分离提取工艺中,确定了粗酶粉和水的比例为1：7效果最好,收率可达97.8%。对于表面活性剂的选择最佳条件是加入O.15%Tween60,收率达到了83%以上。湿酶泥的处理中采用常温干燥后的酶活较高,处理效果要好于真空干燥。