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芹菜素(Apigenin,AP)属于黄酮类物质,广泛存在于水果、蔬菜、豆类、茶叶和中草药中,其中芹菜含量最高。芹菜素的化学结构为4,5,7-三羟黄酮,其4,5,7位置的三个羟基和C2与C3之间的双键决定了其独特的药理学效应和生物学特性,如抗感染、抗氧化、抗心血管疾病、抗癌、抗菌作用等。
蔬菜、水果中的黄酮类物质主要以黄酮苷的形式存在,一般认为,黄酮苷在到达肠道后,先水解然后在肠道菌群的作用下降解,但是其具体代谢情况还不太清楚。本课题通过建立不同种属肠道菌孵育液中芹菜素的检测方法,研究了大鼠、家兔及人肠道菌群对芹菜素的代谢情况,并且比较了正常人群在饮用酸奶前后其肠道菌群对芹菜素的降解。结果如下:
一、建立了一种研究不同种属肠道菌孵育液中芹菜素的高效液相色谱检测方法,色谱柱为C18柱,流动相为甲醇/0.1%磷酸水溶液(3/2,v/v),等度洗脱,流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为339nm。该方法对于大鼠、家兔、人肠道菌孵育液中芹菜素的检出限分别为0.01μg/mL、0.02μg/mL、0.02μg/mL,方法的加标回收率均在95-99.6%之间。该方法灵敏度、准确度高,可以用于肠道菌群对芹菜素代谢的研究。
二、以人工肠液和灭菌的大鼠、家兔及人肠道菌孵育液作为对照,结果表明大鼠、家兔及人肠道菌孵育液中芹菜素的降解主要是肠道菌群的作用,并且大鼠、家兔及人肠道菌群均可以对芹菜素进行代谢降解。孵化1小时后大鼠、家兔和人肠道菌群迅速对芹菜素进行代谢,随着孵化时间的延长,代谢的速度放缓,孵化24小时大鼠肠道菌孵育液中芹菜素降解率为62.31%,家兔和人肠道菌孵育液中芹菜素浓度已降到方法的检出限以下。通过比较发现,大鼠肠道菌群对芹菜素的代谢相对缓慢,而家兔和人肠道菌群对芹菜素的降解相对较快。
三、给十名志愿者饮用酸奶,研究饮用酸奶前后人肠道菌群对芹菜素的代谢。结果表明饮用酸奶后人肠道菌孵育液各个时间点芹菜素的含量均值都大于饮用酸奶前的人肠道菌孵育液。经SAS软件分析,饮用酸奶前后人肠道菌孵育液中芹菜素的含量各个孵化时间点(孵化后1h,4h,8h,24h)均有统计学差异(P<0.05)。说明饮用酸奶后人肠道菌群对芹菜素的降解放缓。