两性离子化合物对脂肪酶活性和稳定性影响的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cenghao
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文考察了磺酸甜菜碱甲基丙烯酸酉(SBMA)对脂肪酶的活性、稳定性和构象变化的影响,以探索两性离子化合物对酶的作用。酶液中添加不同浓度的SBMA。微量(0.1mM)或者高浓度(1M)的SBMA分别可使酶活性提高25.0%、99.2%。脂肪酶的稳定性也得到明显改善。在37℃下保温96h后,游离酶液混浊,相对活性为0.310,而含1M SBMA的酶液保持澄清,相对活性为1.350。在60℃下保温1h,游离酶液的相对活性仅剩0.154,而含1M SBMA的脂肪酶液相对活性为1.133。说明两性离子有利于维持酶分子天然构象。N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺(NAS)修饰酶的氨基完成乙烯基化,然后加入SBMA单体,在引发剂作用下进行氧化还原聚合,获得修饰酶。脂肪酶的氨基修饰度为94.5%。修饰酶具有温度敏感性,在50℃下易从溶液中析出,60℃以上才完全溶于水。修饰酶最适反应温度是55℃,此时游离酶的相对活性为0.276,而修饰酶为1.397。游离酶在pH=3、pH=7.5和pH=10.9下相对活性分别为0.542、1.000和0.433,而修饰酶的相对活性分别对应为0.838、1.397和0.633。紫外光谱显示,在高温、酸性、碱性下,脂肪酶的构象发生了变化。荧光光谱显示,SBMA聚合物的修饰并没有明显改变脂肪酶的天然构象。包埋酶的制备:在乙烯基化脂肪酶液中加入适量的SBMA单体和N,N’-亚甲基双丙烯酰胺交联剂,加入引发剂引发聚合反应,获得包埋酶。当SBMA单体质量为6g,交联剂占单体质量7%时,包埋酶获得最高的活性收率。在正庚烷中,包埋酶的最佳反应温度是40℃。适量的水有利于提高脂肪酶的活性,在含水量为2%时,包埋酶的平衡转化率最高,24h时转化率达到93.7%;在6h时的活性是游离酶最高活性的2.29倍。增加底物浓度会延长反应时间,降低平衡转化率。月桂酸浓度从40mM增加到200mM,包埋酶催化的酯化转化率从93.1%降低到86.4%;而游离的酶粉从91.6%降低到53.6%。说明底物浓度升高,对包埋酶催化更有利。包埋酶有良好的重复使用性,使用6次后依然保留了77.9%的初始活性。
其他文献
普契尼(1858-1924)被认为是威尔第之后最伟大的意大利歌剧作曲家。但让人意外的是,当时很多音乐评论家对其作品的评价不高。例如在1896年《波希米亚人》首映后,一位意大利评
期刊
周杰伦将在一部名叫《灌篮》的篮球电影中领衔主演。该电影于3月在上海开拍,并将于2008年北京奥运前夕上映。听起来很耳熟?这其实是向井上雄彦的《灌篮高手》"致敬"的真人作
期刊
从QQ、论坛、网上社区到大型网游,大多数人对虚拟货币或虚拟生活都不会感到陌生。但最近,有一个社区正在尝试打通虚拟和现实之间的高墙,玩游戏不再是荒废时光,居民在娱乐中找
期刊
非线性共轭梯度算法是最优化方法的一个重要组成部分,常用来解决大型无约束最优化问题。无论在科学计算、工程应用、经济和管理系统中,还是在政府决策、生产管理、交通运输和
约翰·亚当斯是美国第一任副总统及第二任总统,与华盛顿、杰弗逊并称美国独立运动“三杰”。他在美国独立战争期间出使法国、荷兰,参与缔结和平协定,为初生的美国争得极其宝
研究目的:在长期的大负荷、高压力竞技运动训练和比赛环境中,经常进行各种记忆认知操作,易于导致运动员发生各种生理心理疲劳、乃至中枢疲劳,该现象一旦发生会影响运动员训练和比赛状态。为探索记忆认知任务能否诱发中枢疲劳以及中枢疲劳的神经生理机制,采用不同任务难度的1小时记忆操作任务诱发的中枢疲劳对脑功能状态的影响及机制进行探索研究。研究方法:本研究选取符合实验要求的宁波大学体育学院45名运动员大学生(全国
学习小提示:本文涉及物理学内容,有较多专业术语,建议先浏览生词再阅读全文,并对单词进行分类记忆。
D-氨基葡萄糖具有优良的生物活性,在医药中以盐酸盐和硫酸盐的形式广泛使用。目前,D-氨基葡萄糖制备方法有化学合成和液体酸降解壳聚糖制备D-氨基葡萄糖,化学合成过程复杂,产
看到这篇文章时,Rico不禁停下手中活儿,回顾自己的学生生涯。从小学到大学,似乎偶尔会在课堂上交头接耳。当然,这是对老师的不尊重,不值得提倡哦。总是以为长大了才能承担更
期刊
娱乐圈的童星层出不穷,但少有能将少年得志的光环维持到成人的,更少见曾经堕落谷底却凤凰重生的。从当年的童星到后来的《花花公子》女郎,如今则成了好莱坞片酬最高的女星之
期刊