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目的:目前很多研究结果都证明右旋美托咪啶对脑缺血损伤具有保护作用。星形胶质细胞在中枢神经系统中具有营养神经和神经保护作用。我们用神经胶质瘤细胞来研究星形细胞对缺氧缺糖(oxygen and glucose deprivation,OGD)损伤的反应及右旋美托咪啶在此过程中的作用。
方法:将细胞随机分为5组(n=18):空白组(C)、OGD组(O)、右旋美托咪啶组(O+D)、OGD+右旋美托咪啶+育亨宾组(O+D+Y)、OGD+右旋美托咪啶+咪唑克生组(O+D+I)。除空白组,其余各组均进行缺氧缺糖处理。细胞OGD的同时加入右旋美托咪啶,其余各药在右旋美托咪啶前加入。细胞OGD8小时后测定细胞活力,Hoechst33342和PI双重染色观察细胞坏死和凋亡,观察右旋美托咪啶对细胞存活率的影响及各药对右旋美托咪啶的影响,选择对右旋美托咪啶有影响的药物进行下一步Western Blot方法检测蛋白表达。
结果:8小时OGD处理能导致细胞凋亡。在OGD同时用右旋美托咪啶处理细胞能显著提高细胞存活率。这种作用能被2型咪唑受体抑制剂咪唑克生阻断,而α2肾上腺素受体抑制剂育亨宾不能阻断右旋美托咪啶对胶质瘤C6细胞损伤的保护作用。缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible Factor-1α,HIF-1α)及其下游蛋白血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)和发育及DNA损伤反应调节基因(Regulated in development and DNA damage responsesl,REDD1/RTP801)在OGD后表达增加,右旋美托咪啶能降低其表达。而在右旋美托咪啶处理细胞前加入咪唑克生能逆转右旋美托咪啶对上述蛋白表达的影响。
结论:右旋美托咪啶通过2型咪唑啉受体参与了对C6细胞的保护,并能影响HIF-1α、VEGF和RTP801的表达,对鼠神经胶质瘤细胞的OGD损伤产生保护作用。