【摘 要】
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利用多胚混合消化法制备的普通品系SPF鸡胚成纤维胞(CEF)成功地增殖出了A、B亚群禽白血病毒(ALV)实验室标准株RAV-1和RAV-2.分别针对ALV基因组中单一的限制性内切酶KpnI位点
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利用多胚混合消化法制备的普通品系SPF鸡胚成纤维胞(CEF)成功地增殖出了A、B亚群禽白血病毒(ALV)实验室标准株RAV-1和RAV-2.分别针对ALV基因组中单一的限制性内切酶KpnI位点上游的保守序列和囊膜原因gp85(SU)区中单一的限制性内切酶SalI位点下游的保守序列,设计出一结PCR引物.上、下游引物之间跨幅约1.2kb.利用此引物,从感染过RAV-1、RAV-2和未感染过任何ALV的SPF鸡的CEF基因组DNA中都能扩增出大小约为1.2kb的片段.从感染过RAV-1的CEF DNA中扩增出的片段可被限制性内切酶BgⅢ切割成两条大小相近,约为600bp的片段;从感染过RAV-2的CEF DNA中扩增出的片段可被BamHI切割成两条大小相近,约为600bp的片段;从未感染过任何ALV的CEF DNA中扩增出的片段既不能被BgⅢ切割,也不能被BgⅢ切割.上述三种来源的PCR产物无论在片段大小,还是在内部酶切位点上都与相应亚群病毒对应的序列相符.
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