【摘 要】
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目的:分析体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)周期HCG日高孕(progesterone,P)激素环境下子宫内膜HOXA10的表达,并探究孕激素调节HOXA10的机制。方法:1.根据HCG日血清孕激素水平,选择30例因男性因素/输卵管因素在云南省第一人民医院生殖医学科接受IVF/ICSI助孕,取消新鲜移植的女性患者
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目的:分析体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)周期HCG日高孕(progesterone,P)激素环境下子宫内膜HOXA10的表达,并探究孕激素调节HOXA10的机制。方法:1.根据HCG日血清孕激素水平,选择30例因男性因素/输卵管因素在云南省第一人民医院生殖医学科接受IVF/ICSI助孕,取消新鲜移植的女性患者为高孕组(P≥2.10ng/m L),另设自然排卵者30例为对照组,在取卵后或B超监测排卵后7-8天Pipelle管取材子宫内膜,通过免疫组化、Westrn Blot、q RT-PCR对子宫内膜HOXA10、mi R135a表达进行检测、分析。2.体外实验给予不同浓度0、10-8、10-7、10-6、10-5M孕激素共培养细胞24h,Western Blot、RT-PCR检测HOXA10、mi R-135a的表达情况;荧光素酶报告系统验证mi R-135a对HOXA10靶向调控;最后过表达mi R-135a和抑制表达mi R-135a,48h后检测HOXA10表达情况。结果:1.与对照组相比,高孕组子宫内膜中HOXA10表达减少(p<0.05),mi R-135a表达升高(p<0.01);2.HOXA10主要表达于子宫内膜腺上皮细胞,在子宫内膜间质细胞中几乎不表达。3.体外不同浓度孕激素共培养Ishikawa细胞,发现与对照相比,孕激素浓度在10-8到10-6M,细胞中HOXA10表达升高(p<0.05),mi R-135a表达降低(p<0.05);当孕激素浓度增加到10-5M时,细胞中HOXA10表达显著降低(p<0.01),mi R-135a表达明显升高(p<0.05);荧光素酶报告基因结果显示:与对照相比,转染HOXA10 3’UTR野生型(WT)载体质粒组过表达mi R-135a(转染mi R-135a mimics 20n M)后,细胞中荧光活性明显降低(p<0.01);最后在细胞中过表达mi R-135a,HOXA10表达降低(p<0.01);而抑制mi R-135a表达,HOXA10表达升高(p<0.01)。结论:IVF-ET周期HCG日高孕激素水平造成子宫内膜HOXA10表达减少,从而引起子宫内膜容受性降低。其分子机制为:高浓度孕激素上调mi R-135a表达,进而调控HOXA10水平下降,从而导致子宫内膜容受性降低。
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