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球孢白僵菌Beauveria bassiana是一种经典的害虫生防真菌,国外已开发成了一系列商品化制剂用于农林害虫防治。国内研究和应用白僵菌的历史悠久,近年也加快了用于无公害农产品生产的真菌杀虫剂的产业化进程,因为基于昆虫病原真菌的生物杀虫剂符合害虫防治技术革命的要求。在本实验室若干前期工作的基础上,本研究通过建立标准的生物测定方法,系统研究了杀蚜球孢白僵菌SG8702菌株纯孢粉、孢子悬乳剂及其与次亚致死剂量毗虫啉的混配制剂的杀蚜活性,尤其对菌药混配的协同增效作用进行了定量评价,为研发具有自主知识产权的新型真菌杀虫剂提供科学依据。 球孢白僵菌孢子悬乳剂的高效杀蚜活性及其评价方法 将球孢白僵菌菌株SG8702的高纯度孢子粉悬浮在含乳化剂、稳定剂及紫外保护剂的矿物油中而配制成含孢量为100亿/mL的孢子悬乳剂,与未剂型化的孢子粉一起对桃蚜Myzus persicae成蚜进行杀蚜活性的对比生物测定。孢子悬乳剂与孢子粉分别用无菌水稀释成5个序列浓度,用手持式电动弥雾器对甘蓝叶片上蚜虫(30~40头/叶)进行相同时间的弥雾接种,悬乳剂稀释液在叶片上的孢子附着量分别为1.5、6.3、32.6、87.6和701.1个孢子/mm2,孢子粉水悬液的附着量分别为2.8、9.2、52.7、114.8和1005.9个孢子/mm2,各设对照,每浓度处理3次重复(3片叶上蚜虫)。蚜虫接种后置于培养箱(23℃,12L:12D)中饲养,逐日定时观察8d。所获数据经时间—剂量—死亡率模型模拟分析,悬乳剂的剂量效应参数(1.05±0.10)明显高于孢子粉(0.82+0.11),且杀蚜的时间效应提前。用模型参数计算出悬乳剂和孢子粉的LC50及其95%置信区间,接种后第4d分别为9.0(6.9~11.6)和634(263~1532)个孢子/mm2,第7d为3.3(2.4~4.6)和5.3(3.2~8.6)个孢子/mm2,显然随时间后延而降低且相互间差异日趋缩小。悬乳剂和孢子粉的LT50随喷雾后孢子附着量增大而下降,在5个孢子/mm2下分别为4.9d和7.2d,10个孢子/mm2下为4.0d和5.6d,100个孢子/mm2下为3.2d和4.5d。结果表明,孢子悬乳剂的杀蚜活性比未剂型化的孢子粉显著增强。 桃蚜对吡虫啉次亚致死浓度的时间—剂量—死亡率反应 采用电动弥雾法测定了桃蚜对吡虫啉次亚致死浓度(0.01~1.0 μg/mL)为期一周的反应。所获数据经时间—剂量—死亡率模型模拟分析,获得了根据不同期望杀蚜水平的致死浓度和致死时间,且二者互为函数关系,即达到同一期望杀蚜水平的时间越长,所需药液浓度越低,反之亦然。以弥雾后第ld和第sd为例,LCS。及其95%置信限分别为2.8(1.8一4.6)和0.5(0.4一0.6)抖g/mL,LC7。分别为4.3(2.5一7.4)和0.7(0.6一0.9)林g/mL,LCs;分别为6.1(3.4一11.0)和1.0(0.8一1.3)协g/mL,LCgo分别为7.1(3.8一13.0)和1.2(1.0一1.5)林g/mL,LC95分别为8.6(4.5一16.4)和 1.5(1.1一1.9)林g/mL,LC99分别为11.9(6.0一23.9)和2.0(1.5一2.8)协g/mL。当药液浓度为1.0、2.0和3.0卜g/mL时,LTS。分别为2.9d、1.4d和l.od,LT7o分别为4.0d、2‘ld和l.sd,LTg。分别为5.8d、3.6d和2.4d。结果表明,毗虫琳的田间常规使用浓度(一33林岁mL)是按快速击倒要求确定的,它比24h内LC99的上限还高;稍放宽时间要求,达到特定杀蚜水平所需的药液浓度可大幅降低。 球袍白僵菌袍子悬乳剂与叶L虫琳次亚致死浓度对桃蚜的协同效应评价通过室内6个生物测定来确定球抱白僵菌和毗虫琳对桃蚜的协同增效作用,生测1是纯抱剂,生测2是悬乳剂,生测3一6是悬乳剂分别与毗虫琳有效成份0.05、0.1、0.5和1 .0拼g/mL而配制的混配剂。每个生测包括3个剂量(袍子数/mmZ),各设对照,每浓度处理3次重复(30一40头/叶)。结果证明:(l)抱子悬乳剂的杀蚜活性比未剂型化的抱子粉显著增强;(2)微量毗虫琳和球袍白僵菌对蚜虫的控制具有协同增效作用而不是简单的叠加或累积;(3)用TDM模型评价菌药混配的协同增效作用,明显优于其他评价方法。根据TDM模型拟合数据估计出来的致死浓度和致死时间显示,添加微量毗虫琳 (次亚致死用量)可大幅提高白僵菌抱子悬乳剂的控蚜效果而达到田间实用要求。 通过以上研究,与国际规范接轨的杀虫真菌制剂评价的技术体系得以有效地建立起来,并成功地应用于球抱白僵菌悬乳剂、菌药混配剂控蚜效果及其协同增效作用的客观评价。由于毗虫琳近些年在国内大量使用以及它对害蜗种群可能存在的助增作用,慎用毗虫琳的问题值得重视。作为本研究的主要结论,白僵菌制剂与微量化学农药混配,是充分发挥各自杀虫优势、扬长避短的重要技术途径,将有力推动真菌杀虫剂系列产品的实用化及产业化。