人乳牙根生理性吸收区肿瘤坏死因子受体相关因子-6表达的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:spyxin
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目的:乳恒牙替换是体内严格调控的生理过程,破牙细胞是参与乳牙根生理性吸收的主要的功能细胞。肿瘤坏死因子受体相关因子-6(tumor necrosis factor receptor-associate factor 6,TRAF6)是破牙/骨细胞分化激活信号转导通路中重要的胞内接头蛋白。本实验就是研究TRAF6在恒牙和乳牙根生理性吸收区的表达,在乳牙根吸收不同时期时在破牙细胞中表达量的变化规律,尝试探讨TRAF6在乳牙根吸收中的作用。方法:1.恒牙和处于生理性吸收期的乳牙经常温脱钙、包埋、切片,分别用TRAF6抗体和TRAF6原位杂交试剂检测实验牙中TRAF6蛋白和mRNA的表达,Im-pro-plas 6.0分析系统测量两组实验牙中破牙细胞、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞染色的光密度,SPSS13.0统计学分析软件分析其不同表达的规律;2.把生理性吸收期的乳牙按牙根吸收长度不同分为早、中、晚期三组,分别用TRAP抗体、TRAF6抗体和TRAF6原位杂交试剂检测实验牙破牙细胞中TRAP、TRAF6蛋白和TRAF6mRNA的表达,Im-pro-plas 6.0分析系统测量三组染色的光密度,SPSS 13.0统计学分析软件分析早、中、晚期其表达变化的规律。结果:1.乳牙根吸收组破牙细胞、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞TRAF6蛋白及mRNA染色阳性,恒牙组未观察到破牙细胞存在,成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞染色均为阴性。两组同名细胞相比较, t检验得出P<0.01。而实验组中破牙细胞染色光密度大于成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞,P<0.01,有统计学意义;成牙本质细胞和牙髓成纤维细胞间比较无差异。2.乳牙根吸收时破牙细胞中,采用单因素方差分析,TRAP染色早、中、晚期均有差异,P<0.05,中期光密度最高;TRAF6蛋白及mRNA染色早、中期较高,两者之间无显著性差异,但与晚期比较,P<0.05,有统计学意义;三种染色光密度值变化与破牙细胞活性呈正相关关系,值变化曲线基本一致。结论:1.吸收期乳牙根方吸收陷窝内破牙细胞TRAF6免疫组织化学染色和原位杂交染色均为强阳性棕黄染色,提示TRAF6可能参与该细胞的分化和功能活性,引起牙乳牙根吸收的进行。2.破牙细胞TRAP免疫组织化学染色在乳牙根吸收中期光密度值最大,早期次之,晚期最弱。提示TRAP在乳牙根吸收中期功能最强,破骨细胞最为活跃,晚期最弱。3.破牙细胞TRAF6免疫组织化学染色和原位杂交染色,在乳牙根吸收早、中期光密度值高于晚期,而在早、中期差异不大。提示TRAF6在乳牙根吸收早、中期功能最强,破骨细胞最为活跃,晚期较弱。4.破牙细胞TRAP、TRAF6免疫组织化学和mRNA原位杂交染色在各期变化基本是一致的,与破牙细胞活性呈正相关。
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