论文部分内容阅读
目的：研究肺癌组织中FOXM1表达与其预后的关系,构建FOXM1报告基因并通过多种方法研究肺癌细胞株中FOXM1表达情况及其作用机制。方法：1.采用PCR法获得目的基因并与空载体连接构建报告基因；2.采用免疫组织化学法检测80例肺癌组织中FOXM1、KI-67的表达水平,并收集病例临床资料,分析FOXM1、KI-67表达水平与生存时间的关系；3.采用免疫荧光法研究吉非替尼对FOXM1的影响；4.采用western blotting、real-time PCR和转染研究细胞中FOXM1表达水平；5.FOXM1报告基因转染细胞,通过检测报告基因荧光强度,研究尼古丁对FOXM1的影响；6.癌基因c-myc、P-catenin、AKT、抑癌基因RasN17、EP300同FOXM1报告基因共转染,研究其对FOXM1表达的影响。结果：1.80例癌组织中,KI-67强阳性率61.25%,弱阳性率26.25%,阴性率12.50%。FOXM1强阳性率66.25%,弱阳性率25.00%,阴性率8.75%。两者呈正相关,相关系数=0.437。非吸烟组中FOXM1低表达者生存时间比高表达者长,x2=4.439, P=0.035。吸烟组中FOXM1低表达者生存时间比高表达者短,x2=4.613,P=0.032;2.转染实验尼古丁组比对照组荧光强；3.real-time PCR、western blotting和转染表明癌细胞中有FOXM1表达；4.PC9/AB2细胞中FOXM1与CCNB1表达比例异常；5.免疫荧光实验吉非替尼组FOXM1荧光强度比对照组弱；6.共转染实验,相对于对照组,FOXM1报告基因与癌基因共转染组荧光强,与抑癌基因共转染组荧光弱。结论：1.FOXM1在肺癌组织及细胞中高表达且与不良预后相关；2.尼古丁、癌基因c-myc、β-catenin、AKT均与细胞中FOXM1表达上调相关；吉非替尼、抑癌基因RasN17、EP300均与FOXM1表达下调相关；3.FOXM1与CCNB1的表达异常可能与PC9/AB2细胞耐药机制有关；